小鼠胃癌细胞 （MFC）

小鼠胃癌细胞 (MFC)
细胞特性
1)来源：小鼠胃癌
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
运【yùn】输【shū】和【hé】保存：使用含有胎牛血清的【de】2ml冻存管【guǎn】发【fā】送存【cún】活细【xì】胞。收到细胞后【hòu】，可在1000RPM，常温条件下，离【lí】心【xīn】5min后，于洁净操作台弃【qì】去上清，加入推【tuī】荐 使用的培【péi】养基后转移至l〇cm培养皿或【huò】者T25培养瓶中培养，传【chuán】代达到细胞【bāo】生长状态良好时，再进行【háng】冻存。具体操作见细胞培养步骤。
细胞用途：仅供使用。
 
小鼠胃癌细胞 (MFC)细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 RPIVM-1640培养【yǎng】基(RPIVM-1640:GIBCO,添加NaHC031.5g八, D-葡【pú】萄糖2.5g八，丙酮酸钠O.llg八)，90%;胎牛血【xuè】清【qīng】，10%。
2.培养条件：气相：空气，95%;二氧化碳，5%。温度：37摄【shè】氏【shì】度，培养箱 湿度【dù】为70%-80%。
3.冻存【cún】液：90%*培【péi】养【yǎng】基，10%DMSO,现用现配。液氮储存【cún】。 
2)细胞处理：
复苏细胞：将含【hán】有lmL细胞悬液的冻存管【guǎn】在【zài】37°C水浴中【zhōng】迅【xùn】速摇晃【huǎng】解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃【qì】去【qù】上清液，补加l-2mL培【péi】养基后吹匀。然后将所【suǒ】有细胞悬液加【jiā】入培养瓶中培养过【guò】夜【yè】（或【huò】将细胞悬液加入l〇cm皿中，加入【rù】约8ml培养基，培【péi】养过夜）。第二天【tiān】换液并检 查细【xì】胞密【mì】度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞9-21次。
力口【kǒu】2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养【yǎng】瓶中，置于37°C培
养箱中消化9-21分钟，然【rán】后在显微镜下观【guān】察细胞消化【huà】情况，若细胞大部 分变圆【yuán】并脱【tuō】落，迅速【sù】拿回操作台，轻敲【qiāo】几下培养【yǎng】瓶后加少量培养基终止消【xiāo】化【huà】。
按【àn】6-8ml/瓶补加培养基，轻【qīng】轻打匀后【hòu】吸出，在1000RPM条件下【xià】离心4分钟，弃去上清液，补加l-2mL培养液后【hòu】吹匀。
将细【xì】胞悬液按1: 2到【dào】1: 5的【de】比例分到新的含8ml培【péi】养基的新【xīn】皿中或者【zhě】瓶中。
 
细胞冻存：待【dài】细【xì】胞生长状态良好时，可【kě】进【jìn】行细胞冻存。贴【tiē】壁细胞冻存【cún】时，弃【qì】去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱【tuō】落后，加入【rù】约lml含血清的培养基后【hòu】加入冻【dòng】存管中，再【zài】添加1〇%DMSO后【hòu】进行冻存【cún】。
 
小鼠胃癌细胞 (MFC)注意事项：
收到细胞后【hòu】，若【ruò】发现干冰己【jǐ】挥发干净、冻存管瓶盖脱落【luò】、破损及细胞【bāo】有【yǒu】污【wū】染，请【qǐng】立即与我们电联。
所【suǒ】有动物细胞均视【shì】为有潜在的【de】生物危害性【xìng】，必须在二级生物安全台内【nèi】操【cāo】作，并请注意防护【hù】，所有废液及接触过此细胞的【de】器皿【mǐn】需要【yào】灭【miè】菌后方能丢【diū】弃。