小鼠肾小球系膜细胞（SV40-MES-13）

小鼠肾小球系膜细胞(SV40-MES-13)
细胞介绍
该细胞系来源于转染SV40的转基因小鼠的肾脏。
 
细胞特性
1)来源：肾小球，小鼠
2)形态：成纤维细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请先在显微镜下确认细胞生长【zhǎng】状【zhuàng】态，去掉【diào】封口【kǒu】膜并【bìng】将T25瓶置于37°C培【péi】养约2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4.如果细胞【bāo】长【zhǎng】满（90%以上）请【qǐng】及时进行细胞【bāo】传代，传代培养用【yòng】6ml本【běn】公司附带的*培养基。
5.接【jiē】到细胞次日，请检查细胞是【shì】否污染，若发现污【wū】染【rǎn】或疑似污染【rǎn】，请【qǐng】及时与我们【men】取得电联。
细胞用途：仅供使用。
 
小鼠肾小球系膜细胞(SV40-MES-13)本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准【zhǔn】备培【péi】养基(Dulbecco's Modified Eagle's Medium(CatalogNo_30-2002): Ham'sF12mediumwith14mMHEPES=3:l，即三份的【de】DMEM，1份 Ham'sF12
混合培养基)，85%;胎牛血清，5%。
2.培养条件：气相：空气，95%;二氧【yǎng】化碳，5%。温【wēn】度：37°C，培养箱湿【shī】度为70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
2)细胞处理：
复苏细胞：将【jiāng】含【hán】有【yǒu】lmL细胞悬液的冻【dòng】存管迅速【sù】放入37°C水浴中（水面要低 于【yú】冻存【cún】管盖【gài】部）摇晃解冻，移入事先准备好的【de】含有4mL培养基的15ml离心【xīn】 管中混合均匀【yún】。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去【qù】上清【qīng】液【yè】，加入lmL培 养基后吹【chuī】匀。然后将所有细胞悬【xuán】液移入含有【yǒu】5ml培养基的培养瓶中培养过夜。 第二天换【huàn】液并【bìng】检查细胞密度【dù】。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞9-21次。
力【lì】口2m丨【shù】消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培【péi】养瓶中，置于37°C培
养箱中【zhōng】消化9-21分钟【zhōng】，然后在显微【wēi】镜下观察细【xì】胞消化情况，若细胞大部分【fèn】变【biàn】圆并脱落【luò】，迅速拿【ná】回操作台，轻敲几【jǐ】下培【péi】养瓶【píng】后加入3ml此细胞的培养基终止消化【huà】。
轻轻吹打后吸出，移入15ml离心管中，在1000RPM条件【jiàn】下离心【xīn】4分钟，弃去上【shàng】清液，加入lmL培养液后吹【chuī】匀。
移入到【dào】事先准【zhǔn】备好的含有5ml培养【yǎng】基的T-25培养瓶中【zhōng】或含有14ml培养基的T-75培养瓶【píng】中培【péi】养。
 
细胞【bāo】冻存：待【dài】细胞生长状态良好【hǎo】时，可进行细胞冻【dòng】存。贴壁细胞冻存时，先要消化【huà】处理并进行细胞计数。消化方法按照【zhào】细胞传【chuán】代方【fāng】法的9-21步骤进行， 后的重悬液使用血清。悬浮【fú】细胞直接计数后离心【xīn】，用血清重悬【xuán】浮【fú】，加DMSO至终浓度为【wéi】10%。加入DMSO后迅【xùn】速混匀，按【àn】每lml的数量分【fèn】配到冻存管【guǎn】 中。本公司按每个【gè】冻存管细胞【bāo】数目大【dà】于1X106个细胞冻存。
 
小鼠肾小球系膜细胞(SV40-MES-13)注意事项：
收【shōu】到细胞后，若发现干冰己挥发干净【jìng】、冻存管【guǎn】瓶盖【gài】脱落、破【pò】损【sǔn】及细【xì】胞有污染，请立即与我们电联。
所有动物【wù】细胞均视为【wéi】有潜在的生物危害性，必须在【zài】二级【jí】生物【wù】安全台【tái】内操作，并请【qǐng】注意防护，所有废液及接触【chù】过【guò】此【cǐ】细胞的器皿需要灭菌【jun1】后方能丢弃【qì】。