小鼠结肠癌细胞（MC-38）

小鼠结肠癌细胞(MC-38)
细胞特性
1)来源：结肠癌
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
运输和保存：使用【yòng】含有胎牛血清的2ml冻存管发送存活细胞。收到细胞后，可【kě】在1000RPM，常温【wēn】条件【jiàn】下，离心5min后，于洁净【jìng】操作台弃【qì】去上清，加入【rù】推荐【jiàn】使用的培养基后【hòu】转【zhuǎn】移【yí】至l〇cm培养皿或【huò】者T75培养瓶【píng】中培养【yǎng】，传代【dài】达到细胞生长状【zhuàng】态良【liáng】好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养【yǎng】步骤。
细胞用途：仅供使用。
 
细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准【zhǔn】备 DMEM 培养【yǎng】基(DMEM，GIBCO)，90%;胎牛血清【qīng】，10%。
2.培养条件：气相：空【kōng】气，95%;二氧化碳，5%。温【wēn】度：37摄氏【shì】度，培养箱 湿度【dù】为70%-80%。
3.冻存液：90%*培【péi】养基，10%DMSO,现用现配。液氮储存【cún】。
 
2)细胞处理：
复【fù】苏细胞：将含有lmL细胞悬【xuán】液的冻存管在【zài】37°C水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加l-2mL培【péi】养基【jī】后吹【chuī】匀。然后将所有【yǒu】细【xì】胞悬液加入培养【yǎng】瓶中培【péi】养【yǎng】过夜（或将细胞悬【xuán】液加入l〇cm皿中【zhōng】，加【jiā】入约【yuē】8ml培【péi】养基，培养过夜【yè】）。第二天换【huàn】液【yè】并【bìng】检 查细胞密【mì】度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
小鼠结肠癌细胞(MC-38)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞9-21次。
力【lì】口2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中，置【zhì】于【yú】37°C培
养【yǎng】箱中消化【huà】9-21分【fèn】钟，然【rán】后在显微【wēi】镜下观察细【xì】胞消化情况，若细【xì】胞大部 分变圆并【bìng】脱落，迅速【sù】拿回操作台，轻敲【qiāo】几下培养瓶后加少量培养基终止消【xiāo】化。
按6-8ml/瓶【píng】补【bǔ】加培【péi】养基，轻轻【qīng】打匀后吸出，在1000RPM条件下离心【xīn】4分钟【zhōng】，弃【qì】去上清液，补加l-2mL培【péi】养液后吹匀。
将细胞【bāo】悬液按1: 2到1: 5的比例【lì】分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶【píng】中。
 
细【xì】胞冻存：待细【xì】胞生【shēng】长状态良好时，可进【jìn】行细【xì】胞冻【dòng】存。贴壁细胞冻存时，弃去培养【yǎng】基后加入少量胰酶，细胞变【biàn】圆脱【tuō】落后，加入约lml含血清的【de】培养基后【hòu】加入冻【dòng】存管中，再【zài】添加1〇%DMSO后【hòu】进行冻存。
 
小鼠结肠癌细胞(MC-38)注意事项：
收【shōu】到【dào】细胞后，若【ruò】发现干【gàn】冰【bīng】己挥发干净、冻存【cún】管瓶盖【gài】脱落、破损及细胞有污染，请立【lì】即与我们电联。
所有动物细胞【bāo】均视为有【yǒu】潜【qián】在的生物危【wēi】害性，必须【xū】在二级【jí】生【shēng】物安全台内操作，并请注【zhù】意防护，所有废液及接触过【guò】此细胞的器皿需要灭【miè】菌后方【fāng】能【néng】丢弃。