小鼠白血病细胞（P388）

小鼠白血病细胞(P388)
细胞特性
1)来源：小鼠
2)形态：圆形，悬浮生长
3)含量：>lxl06个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
运【yùn】输和保【bǎo】存：使用含有胎牛血清的2ml冻存管【guǎn】发送存活【huó】细胞。收到细胞后，可在【zài】1000RPM，常【cháng】温【wēn】条件下【xià】，离心【xīn】5min后，于洁【jié】净【jìng】操作台【tái】弃去上清，加入推荐【jiàn】 使用的培养基后【hòu】转移至l〇cm培养皿或者T25培养瓶中培养，传代达到细【xì】胞【bāo】生长【zhǎng】状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞【bāo】培养【yǎng】步骤。
细胞用途：仅供使用。
 
小鼠白血病细胞(P388)细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准【zhǔn】备【bèi】 RPIVM-1640培养基(RPIVM-1640:GIBCO,添加 NaHC031.5g八, D-葡萄糖2.5g八【bā】，丙酮【tóng】酸【suān】钠O.llg八)，90%;马血清，10%。
2.培养【yǎng】条件：气【qì】相：空气，95%;二【èr】氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱 湿度为【wéi】70%-80%。
3.冻存液：90%*培养【yǎng】基【jī】，10%DMSO,现【xiàn】用现配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将含有【yǒu】lmL细胞悬液的冻存管在37°C水【shuǐ】浴中迅【xùn】速摇晃解冻，加入【rù】4mL培【péi】养基混合均匀。在1000RPM条件下【xià】离【lí】心4分钟【zhōng】，弃去上【shàng】清液，补加l-2mL培养【yǎng】基后吹【chuī】匀。然后将【jiāng】所有细胞悬液加入培养瓶中【zhōng】培养过【guò】夜（或将细胞【bāo】悬【xuán】液加入l〇cm皿中，加入约8ml培【péi】养基，培【péi】养过夜【yè】）。第二天换液并检 查细胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条【tiáo】件【jiàn】下离心5分钟，弃【qì】去上清【qīng】液，补【bǔ】加 l-2mL培养液后吹句，将细胞悬液按1: 2到1: 5的比【bǐ】例分【fèn】到新的含8ml培【péi】 养基的新皿【mǐn】中或【huò】者瓶中。
方法二【èr】：可选择半数换【huàn】液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞【bāo】悬起，将细胞悬【xuán】液按【àn】1: 2到1: 3的比例分到新的含8ml培养基【jī】的【de】新皿中【zhōng】或【huò】者瓶中。
细胞冻存：待细胞生长【zhǎng】状态良【liáng】好时，可进行细【xì】胞冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收【shōu】集，1000RPM，常【cháng】温条件下离心【xīn】5分【fèn】钟，少量保存上清液（防【fáng】止细胞吸【xī】走【zǒu】)，加入【rù】部【bù】分新鲜培养基，吹打均匀后，加【jiā】入到冻存管中，在【zài】冻存管中加入10%DMSO摇【yáo】匀后进行冻存。
 
小鼠白血病细胞(P388)注意事项：
收到【dào】细胞后，若发现干冰己【jǐ】挥发干净、冻【dòng】存管瓶【píng】盖脱落、破损及细【xì】胞有污染，请立即与我们【men】电联【lián】。
所有动【dòng】物【wù】细胞均视为有潜在的生【shēng】物危害性，必【bì】须在二级生物【wù】安【ān】全【quán】台内操作，并请注意防护，所有废液及接【jiē】触过此细胞【bāo】的器【qì】皿需要灭【miè】菌后方能丢弃。