小鼠胰岛素瘤胰岛β细胞（Beta-TC-6）

小鼠胰岛素瘤胰岛β细胞（Beta-TC-6）
细胞介绍
这株细胞来源于转基因【yīn】小鼠中生【shēng】长的一个胰【yí】腺肿瘤(胰岛素瘤【liú】)。这【zhè】种小鼠携带了大鼠胰岛素【sù】II基因启【qǐ】动子调控的SV40早期基因【yīn】的【de】假【jiǎ】基因结构。细胞包含丰富【fù】的【de】胰岛【dǎo】素【sù】和小量的胰高血【xuè】糖【táng】素及生长抑素。响【xiǎng】应葡萄糖而分泌胰岛素[PubMed:7533732]
 
细胞特性
1)来源：胰岛素瘤
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请先在显【xiǎn】微镜下【xià】确认细【xì】胞【bāo】生长状【zhuàng】态，去掉封口膜并将T25瓶【píng】置于37°C培养约2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4.如果细胞长满【mǎn】（90%以上）请及时【shí】进行细胞传代，传代培【péi】养用【yòng】6ml本公司附【fù】带的*培养基。
5.接到细胞次日，请【qǐng】检查细胞是否污染，若【ruò】发【fā】现【xiàn】污染【rǎn】或疑【yí】似污染，请及【jí】时与我们取得【dé】电联。
 
小鼠胰岛素瘤胰岛β细胞（Beta-TC-6）细胞用途：仅供使用。
本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备【bèi】 DMEM/F12 培养基(DMEM/F12，GIBCO)，90%;胎牛血清，10%。
2. 培养条件：气相【xiàng】：空【kōng】气，95%;二氧化碳【tàn】，5%。温度：37°C，培养箱【xiāng】湿度为 70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将含有lmL细胞悬【xuán】液的冻存管迅速放入37°C水浴【yù】中（水面要【yào】低于冻存【cún】管盖部）摇晃解【jiě】冻，移入事【shì】先准备好的含有【yǒu】4mL培养【yǎng】基的15ml离心管中混合均匀。在【zài】1000RPM条件下离心【xīn】4分钟，弃去上【shàng】清【qīng】液【yè】，加入【rù】lmL培【péi】
养基后吹匀。然后【hòu】将所有细胞悬【xuán】液移入【rù】含有5ml培养【yǎng】基的培养瓶中培养【yǎng】过夜。
 
第二天换液并检查细胞密度。
细胞传代：如果细胞密度【dù】达80%-90%，即【jí】可进行传代【dài】培养。对于贴壁细【xì】胞，传代可参考以【yǐ】下方法：弃去培【péi】养上清，用不含【hán】钙、镁离子的PBS润【rùn】洗细胞9-21次【cì】。力口 2m丨消【xiāo】化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶【píng】中，置于37°C培养箱【xiāng】中消化9-21分钟，然后在显微镜下观察细胞【bāo】消化情【qíng】况【kuàng】，若细胞大部分变圆并脱落，迅速【sù】拿回操作台【tái】，轻敲几下【xià】培养瓶后加入3ml此细胞的培养【yǎng】基终止消化。轻轻吹打后吸出，移入15ml离心管中，在1000RPM条件下离心4分钟，弃【qì】去上【shàng】清液，加入【rù】lmL培养液后【hòu】吹匀。移入到【dào】事先【xiān】准备好的【de】含有【yǒu】5ml培养【yǎng】基的T-25培【péi】养【yǎng】瓶【píng】中或含有14ml培养的T-75培养瓶中【zhōng】培养。
 
细胞冻存：
待【dài】细【xì】胞生长状【zhuàng】态良好【hǎo】时，可进行细胞【bāo】冻存。贴壁细胞冻存【cún】时，先要【yào】消化处理并进【jìn】行【háng】细胞计数。消化方法按照细【xì】胞传代【dài】方【fāng】法的9-21步骤进行，后的重悬【xuán】液使用血【xuè】清。悬浮细胞直接计数后离心，用血【xuè】清重悬浮【fú】，加DMSO至终【zhōng】浓【nóng】度为【wéi】10%。加入DMSO后迅速混匀【yún】，按每lml的数量分配到冻存管【guǎn】中。本公司按每个冻存管细胞数目【mù】大于1X106个细【xì】胞冻存。 
 
小鼠胰岛素瘤胰岛β细胞（Beta-TC-6）注意事项：
收到细胞后，若【ruò】发现干冰己【jǐ】挥发干净【jìng】、冻存【cún】管【guǎn】瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请【qǐng】立即【jí】与我【wǒ】们电联。
所有动物细胞【bāo】均视为有潜【qián】在【zài】的生物【wù】危害性，必须【xū】在二级【jí】生【shēng】物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接【jiē】触过此细胞的器【qì】皿需要灭菌后方【fāng】能丢【diū】弃。