绒猴EBV转化的白细胞（B95-8）

绒猴EBV转化的白细胞(B95-8)
细胞介绍
B95-8细胞株源【yuán】自暴露于人【rén】白血球中抽提的EB病毒的绒【róng】猴白血球。B95-8是一个【gè】连续株并释放高滴度的转染EB病【bìng】毒【dú】。此【cǐ】细【xì】胞株提供【gòng】EB病毒用于【yú】建立人的连【lián】续淋巴细【xì】胞株。
 
细胞特性
1)来源：外周血淋巴细胞
2)形态：淋巴母细胞样，悬浮生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请先在显微镜下确认【rèn】细胞生长【zhǎng】状态，去掉封口膜并【bìng】将T25瓶【píng】置于37°C培【péi】养2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4. 如果细胞长【zhǎng】满（90%以上【shàng】）请及【jí】时进【jìn】行细胞传代，传代培养用6ml本公【gōng】司附带的【de】*培养【yǎng】基。
5.接到细胞次日【rì】，请检查细【xì】胞是否【fǒu】污染，若发【fā】现污【wū】染或疑似污染，请【qǐng】及时【shí】与我们取得电联。
 
绒猴EBV转化的白细胞(B95-8)细胞用途：仅供使用。
本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
准备 RPIVM-1640 培养【yǎng】基【jī】(RPMI-1640: GIBCO)，90%;胎牛血清，10%。
培养【yǎng】条件：气【qì】相：空气，95%;二氧化碳，5%。温【wēn】度：37°C，培【péi】养箱【xiāng】湿度为 70%-80%。
冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
2)细胞处理：
复苏细胞：将含【hán】有lmL细胞悬液的冻【dòng】存管迅速放入37°C水浴中（水面要低于冻存管盖【gài】部）摇【yáo】晃解冻，移入【rù】事先准【zhǔn】备好【hǎo】的含有【yǒu】4mL培养基的15ml离心【xīn】管中混合均匀。在【zài】1000RPM条【tiáo】件下离心4分钟，弃去上清液，加入lmL培
养基后吹匀【yún】。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培【péi】养基的培养【yǎng】瓶中培养过夜。第二【èr】天换液【yè】并检查细胞密度。细胞传代：如果细胞密度达【dá】80%-90%，即可【kě】进【jìn】行传代培养。对于【yú】悬【xuán】浮细胞【bāo】，传代可【kě】参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常【cháng】温条件下离心5分钟，弃去上清【qīng】液，补加l-2mL培养液后吹句，将细【xì】胞悬【xuán】液按1: 2到1: 5的比例【lì】分到新的含【hán】8ml培【péi】养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可【kě】选择半数【shù】换液【yè】方式，弃去半【bàn】数培养基后，将【jiāng】剩余细胞悬起【qǐ】，将细【xì】胞悬液按1: 2到【dào】1: 3的比例分【fèn】到新的含【hán】8ml培养基的【de】新皿中或【huò】者【zhě】瓶中【zhōng】。细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进【jìn】行细胞【bāo】冻存【cún】。悬浮细胞【bāo】冻存时，应将【jiāng】收集，1000RPM，常温条件下【xià】离【lí】心5分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走)，加入部分新鲜【xiān】培养基，吹打【dǎ】均【jun1】匀后，加入到【dào】冻存管中，在冻存【cún】管中加入【rù】10%DMSO摇匀后【hòu】进行冻存。
 
绒猴EBV转化的白细胞(B95-8)注意事项：
收【shōu】到细胞【bāo】后，若发现干【gàn】冰己挥【huī】发干净、冻存【cún】管瓶盖【gài】脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们电联。
所有动【dòng】物细胞均视为有潜在的生【shēng】物危害性【xìng】，必须在二级生物安全台内【nèi】操作，并请注意防【fáng】护，所有废液及接触【chù】过此细【xì】胞【bāo】的【de】器皿需要灭菌后【hòu】方能丢弃。