非洲绿猴SV40转化的肾细胞（C0S-7）

非洲绿猴SV40转化的肾细胞(C0S-7)
细胞介绍
此细胞株源自【zì】CV-1细胞株，经带【dài】有编码野生型T抗原的【de】起【qǐ】始失活突【tū】变的SV40转【zhuǎn】染得到【dào】。
 
细胞特性
1)来源：非洲绿猴肾
2)形态：成纤维细胞，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请【qǐng】先【xiān】在显微镜下确【què】认细胞【bāo】生长【zhǎng】状态，去掉封口【kǒu】膜【mó】并将T25瓶置于37°C培养约2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4.如果细胞【bāo】长满【mǎn】（90%以【yǐ】上【shàng】）请及时进行细胞传代【dài】，传代培养【yǎng】用6ml本公司附【fù】带的*培养基。
5.接到细胞次日，请检查细胞【bāo】是【shì】否污【wū】染，若发现污染或疑【yí】似【sì】污染，请及时【shí】与【yǔ】我们取得电联。
 
非洲绿猴SV40转化的肾细胞(C0S-7)细胞用途：仅供使用。
本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 DMEM 培养基(DMEM，GIBCO)，90%;胎牛血清【qīng】，10%。
2. 培养条件：气相：空气，95%;二【èr】氧化碳【tàn】，5%。温度：37°C，培养箱湿度为 70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将含有lmL细胞悬液的冻存【cún】管迅速放【fàng】入【rù】37°C水浴中（水面要低于冻存管【guǎn】盖【gài】部）摇晃解冻【dòng】，移入事先准备好【hǎo】的【de】含有4mL培养基的15ml离心管中【zhōng】混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液【yè】，加入lmL培养基后吹匀【yún】。然后将【jiāng】所【suǒ】有细胞悬液移【yí】入含有5ml培养基的培养瓶中培【péi】养过夜。第二天换【huàn】液并检【jiǎn】查细胞密度。细胞传代：如【rú】果细胞【bāo】密【mì】度达80%-90%，即【jí】可【kě】进行传代培养。对于贴壁细胞【bāo】，传代可参考以【yǐ】下【xià】方法：弃【qì】去培养上清，用不【bú】含钙、镁离子的PBS润洗【xǐ】细胞9-21次。力口 2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于【yú】培养【yǎng】瓶中【zhōng】，置于37°C培养箱中消化9-21分钟，然后在显【xiǎn】微镜下观察细胞消化情况，若细胞大【dà】部分【fèn】变圆并脱落【luò】，迅速拿【ná】回操作台，轻【qīng】敲几下培养瓶后加入3ml此细胞的培养基终止【zhǐ】消化。轻【qīng】轻【qīng】吹打后吸【xī】出，移【yí】入15ml离【lí】心管中，在1000RPM条【tiáo】件下【xià】离心4分钟，弃【qì】去上清液【yè】，加【jiā】入lmL培【péi】养【yǎng】液【yè】后吹匀【yún】。移【yí】入到事先准【zhǔn】备好的含有5ml基的T-25培养【yǎng】瓶中或含有14ml培养基的T-75培养瓶中培养。细胞冻存【cún】：待【dài】细【xì】胞生长状态良【liáng】好时，可进行细胞【bāo】冻存。贴壁细胞冻存时，先要消化处理【lǐ】并进【jìn】行【háng】细胞计数【shù】。消化方【fāng】法按照细胞传代【dài】方法【fǎ】的9-21步骤进行，后【hòu】的【de】重悬【xuán】液使用血清【qīng】。悬浮细胞直接计数【shù】后【hòu】离心【xīn】，用血【xuè】清重悬浮，加DMSO至终【zhōng】浓度为10%。加入DMSO后【hòu】迅速混匀，按每lml的数量分配到冻存管中。本公【gōng】司按每个【gè】冻【dòng】存管细胞数目大于1X106个细【xì】胞【bāo】冻存。
 
非洲绿猴SV40转化的肾细胞(C0S-7)注意事项：
收到细胞后【hòu】，若发现干冰【bīng】己挥发干净、冻存管【guǎn】瓶盖脱落、破损及【jí】细胞有污染，请【qǐng】立即与我们电联【lián】。
所有动【dòng】物细胞均视【shì】为有潜【qián】在【zài】的【de】生物【wù】危害性，必须在二级生物安全台内【nèi】操作，并请注【zhù】意【yì】防护，所有废液及接触过此细胞【bāo】的器皿需要灭菌后【hòu】方能丢弃。