非小细胞肺癌细胞（H1792）

非小细胞肺癌细胞(H1792)
细胞特性
1)来源：肺癌
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请先在显微镜【jìng】下确认【rèn】细胞生长状态【tài】，去掉封口膜并将T25瓶置于【yú】37°C培【péi】养约2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4. 如【rú】果细胞【bāo】长满【mǎn】（90%以上）请及时进行细胞传代，传代培养用6ml本公【gōng】司【sī】附带的【de】*培养【yǎng】基。
5.接【jiē】到【dào】细胞次日，请检查细胞是否污染【rǎn】，若【ruò】发现污染或【huò】疑似污【wū】染，请及时与【yǔ】我们取得电联【lián】。
 
非小细胞肺癌细胞(H1792)细胞用途：仅供使用。
本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 RPIVM-1640 培养【yǎng】基（RPMI-1640，GIBCO)，90%;胎牛血清，10%。
2.培【péi】养条【tiáo】件：气相：空气，95%;二氧化碳【tàn】，5%。温度【dù】：37°C，培养箱湿度为【wéi】 70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细【xì】胞【bāo】：将含有【yǒu】lmL细胞悬液的冻【dòng】存【cún】管迅【xùn】速【sù】放入37°C水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻【dòng】，移入事【shì】先准备好的含【hán】有4mL培养基【jī】的【de】15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离【lí】心4分钟，弃去上清液，加【jiā】入lmL培【péi】养基后吹【chuī】匀。然后将所有细【xì】胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培【péi】养过夜【yè】。
第二天换液并检查细胞密度。
细胞传代【dài】：如【rú】果细胞密【mì】度【dù】达80%-90%，即可进行传代培【péi】养。对【duì】于贴壁细胞，传代可参考【kǎo】以下【xià】方法：弃去培养上清，用【yòng】不含钙、镁离子的PBS润【rùn】洗细胞9-21次。力口 2m丨消【xiāo】化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于【yú】培养瓶中【zhōng】，置于37°C培养【yǎng】箱中消化9-21分【fèn】钟，然后【hòu】在显【xiǎn】微【wēi】镜下观【guān】察细胞消化情况【kuàng】，若细胞大部分变圆并脱【tuō】落，迅速拿回【huí】操作台，轻敲【qiāo】几【jǐ】下培养瓶【píng】后【hòu】加入3ml此细胞的培【péi】养基终止消化。轻轻吹打后吸出【chū】，移入15ml离心【xīn】管中，在【zài】1000RPM条【tiáo】件下离心4分钟，弃去上清液，加【jiā】入lmL培养【yǎng】液后吹匀。移入到事【shì】先准备【bèi】好的【de】含【hán】有5ml培养基【jī】的T-25培养瓶中或含有【yǒu】14ml培基【jī】的【de】T-75培养瓶中【zhōng】培养。细胞冻存：待细胞生长状态良好【hǎo】时【shí】，可【kě】进行【háng】细胞冻存。贴壁细【xì】胞冻存时，先要消化处理并进行细胞计数。消【xiāo】化方法按照细胞传代【dài】方法的【de】9-21步骤进行，后的重悬液使【shǐ】用血清。悬浮细【xì】胞直接计数后离心，用【yòng】血清重悬浮，加DMSO至【zhì】终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按【àn】每lml的数量分配【pèi】到冻存管中。本公【gōng】司按每【měi】个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
 
非小细胞肺癌细胞(H1792)注意事项：
收到细胞后，若发现干【gàn】冰【bīng】己挥发干净、冻存管【guǎn】瓶盖脱落【luò】、破损【sǔn】及【jí】细胞有【yǒu】污染，请立即与我们【men】电联。
所有动【dòng】物细胞均视为有潜【qián】在的生物危【wēi】害性，必须在二级生物安全【quán】台【tái】内操作【zuò】，并请注意防【fáng】护，所有废液及接触过【guò】此细胞【bāo】的器皿需要【yào】灭菌后【hòu】方【fāng】能丢弃。