马媾疫锥虫PCR检测试剂盒

产品介绍：

产品名称：马媾疫锥虫PCR检测试剂盒

英文名称：Trypanosoma equiperdumPCR

组成及试剂配制:

1、 酶标板：一块（96孔）

2、 标【biāo】准【zhǔn】品（冻干品）： 2瓶【píng】，请临用前15分钟【zhōng】内配制。每瓶【píng】以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静【jìng】置【zhì】大约10分钟，同时【shí】反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为【wéi】200 U/L，然后做【zuò】系【xì】列倍比稀【xī】释（注：不【bú】要【yào】直【zhí】接在【zài】板中【zhōng】进行倍比稀释【shì】），分别配【pèi】制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作【zuò】为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标【biāo】准品：取0.3ml （不要少【shǎo】于【yú】0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品【pǐn】稀释液【yè】的Eppendorf管中，混匀即可【kě】，其余浓度以此【cǐ】类推。

3、 样品稀释液：1×20ml。

4、 检测稀释液A：1×10ml。

5、 检测稀释液B：1×10ml。

样本采集、存放及运输：

1、样本采集：各类型样本按照常规方法采集。

2、马媾疫锥虫PCR检测试剂盒存【cún】放：样本在2~8℃条件下保存应不超过72h，-70℃以【yǐ】下【xià】可长期保【bǎo】存，但【dàn】应避免反复【fù】冻融【róng】（zui多冻融3次【cì】）。

3、运输：采用泡沫箱加冰密封进行运输。

特点优势：

1.特【tè】异性：所有【yǒu】产品【pǐn】使用【yòng】的引物均经过详尽的生物信【xìn】息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库【kù】的比对，确保所【suǒ】用的每一条引物均为种属或【huò】血清型特异的基因序列【liè】区段，可实【shí】现对种属及血【xuè】清型的【de】特异【yì】检测，特【tè】异性均【jun1】达【dá】到100%。

2.重现性：该系列所有产【chǎn】品均经过大量实验菌株的验证【zhèng】，重【chóng】现【xiàn】性为【wéi】100%。

3.灵敏性：该系列产品可实【shí】现对检【jiǎn】测菌的高灵敏检测，当样品【pǐn】中的浓度达到【dào】103cfu/ml时，可实现对其的【de】直接检【jiǎn】测，无需繁【fán】琐【suǒ】的增菌【jun1】过程。

4.实用性：检测范围广，涵【hán】盖了对【duì】人体危害较为严重的17种呼吸道及肠【cháng】道致【zhì】病菌，可实现对临【lín】床样【yàng】品及【jí】其【qí】他【tā】环【huán】境【jìng】取样的快速检测，整【zhěng】个检测过程为9-21个小时。

5.优势1：序列【liè】资【zī】源丰富，除GenBank公布的【de】序列外，公司还进行了大【dà】量菌株的序列【liè】破译，从理论上保证所选引物具【jù】有良【liáng】好的保守性和特异【yì】性。

6.优【yōu】势2：该系列试剂盒均经过大【dà】量的保【bǎo】守【shǒu】性及【jí】特异性实验验证，凭借公司拥【yōng】有【yǒu】的丰富的菌种资源，每一种【zhǒng】检测试剂盒【hé】均【jun1】经过了20余【yú】种【zhǒng】标【biāo】准【zhǔn】菌株【zhū】和临床菌株的【de】保守性验证及40余种【zhǒng】近缘标准菌株和临床菌株【zhū】的特异性【xìng】验证，确保在使【shǐ】用过程中不会出现任何的【de】假阳性及假阴性报【bào】告结果。

使用方法：

注【zhù】：所有试剂使用前需*解冻，混合均匀【yún】，6,000rpm离心数【shù】秒后使用。

1. 样本处理（样本处理区）

待检样本的【de】核酸提取【qǔ】可采用病毒【dú】RNA提取试【shì】剂盒或自动化【huà】核酸提取仪等，具体【tǐ】提取【qǔ】方法请参照相关说明书。阳性质【zhì】控品及阴【yīn】性质控【kòng】品【pǐn】无需提取，可直接使用。

2. 扩增试剂准备（PCR前准备区）

取N个（N=阴性质控品+待【dài】检样本+阳性质控品）PCR反应管，每管【guǎn】分别【bié】加入FMD RT-PCR反【fǎn】应【yīng】液19μl、RT-PCR酶【méi】1 μl (也【yě】可根据每头份用量【liàng】计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量，两者【zhě】混匀离心【xīn】后分装20 μl至单个PCR反【fǎn】应管)。组分每头份用【yòng】量FMD  RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶【méi】。

1 .将所有【yǒu】PCR反应管【guǎn】于【yú】6,000rpm离【lí】心【xīn】30s，转移至样本处理区。

2.马媾疫锥虫PCR检测试剂盒加样（样本处理区）

3.在上述【shù】的PCR反应管中分【fèn】别加入待检【jiǎn】样本RNA提取物、阴性质【zhì】控品和阳性质【zhì】控【kòng】品各5 μl，盖【gài】紧管盖，于6,000rpm离心10s，转【zhuǎn】移【yí】至扩增区。