马红球菌PCR检测试剂盒

产品介绍：

产品名称：马红球菌PCR检测试剂盒

英文名称：Rhodococcus equiPCR

组成及试剂配制:

1、 酶标板：一块（96孔）

2、 标准品【pǐn】（冻【dòng】干品）： 2瓶，请【qǐng】临用前15分【fèn】钟【zhōng】内配制【zhì】。每瓶以样品稀【xī】释液【yè】稀释至0.5ml，盖【gài】好后室温【wēn】静置大约10分钟【zhōng】，同时反复颠【diān】倒/搓【cuō】动以【yǐ】助溶解，其浓度【dù】为200 U/L，然后【hòu】做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进【jìn】行倍【bèi】比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作【zuò】为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取【qǔ】0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品【pǐn】加入含有0.3ml样品稀释液的【de】Eppendorf管中，混匀即可，其【qí】余浓度以此类推【tuī】。

3、 样品稀释液：1×20ml。

4、 检测稀释液A：1×10ml。

5、 检测稀释液B：1×10ml。

样本采集、存放及运输：
1、样本采集：各类型样本按照常规方法采集；

2、马红球菌PCR检测试剂盒存放：样本在【zài】2~8℃条【tiáo】件【jiàn】下保存应【yīng】不超过【guò】72h，-70℃以下可长期保存，但【dàn】应避免反复冻融（zui多冻融3次）；

3、运输：采用泡沫箱加冰密封进行运输。

特点优势：

1.特【tè】异性：所有产品【pǐn】使用的引物均【jun1】经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及【jí】自建【jiàn】庞【páng】大数【shù】据【jù】库【kù】的比对【duì】，确保所用【yòng】的每【měi】一条引物均为种【zhǒng】属或血清型特异的基因【yīn】序列区段，可实现【xiàn】对种属及血【xuè】清型的特异检测【cè】，特异性均达到100%。

2.重【chóng】现性：该系列所有产品均经【jīng】过【guò】大量实验菌株【zhū】的验【yàn】证，重现性为100%。

3.灵敏性：该系列产品可【kě】实现对【duì】检测菌的【de】高灵敏检【jiǎn】测，当样【yàng】品中的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的【de】直接【jiē】检测，无需繁【fán】琐【suǒ】的增菌过程【chéng】。

4.实【shí】用性：检测范围广，涵【hán】盖【gài】了【le】对人体危害【hài】较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌【jun1】，可实现【xiàn】对临床样品及其他环境取样的【de】快速检【jiǎn】测，整个【gè】检测过程为9-21个【gè】小时。

5.优【yōu】势1：序列资源丰富，除【chú】GenBank公布【bù】的【de】序列外，公司【sī】还进行【háng】了大量菌株的【de】序列破译，从理论上保证所选引物【wù】具有良好的保守性和【hé】特异性。

6.优势2：该系列试剂【jì】盒均经过大量【liàng】的保【bǎo】守性及特异性实验【yàn】验证，凭借公司拥【yōng】有【yǒu】的丰富的菌【jun1】种资源，每一种检测试剂盒【hé】均经【jīng】过了20余种标准菌株和临【lín】床菌【jun1】株的保守性验证【zhèng】及40余种近【jìn】缘标准【zhǔn】菌【jun1】株和【hé】临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及【jí】假阴【yīn】性报【bào】告结果【guǒ】。

使用方法：

注：所有试剂【jì】使用前需*解冻【dòng】，混合均匀，6,000rpm离心【xīn】数秒后【hòu】使【shǐ】用。

1. 样本处理（样本处理区）

待检样【yàng】本的核酸提取可采用病毒RNA提【tí】取试剂盒【hé】或自动【dòng】化核【hé】酸提取仪【yí】等，具体提取【qǔ】方法请【qǐng】参照相关【guān】说明书；阳【yáng】性质控【kòng】品及阴性质控品【pǐn】无需【xū】提取，可直接使用。

2. 扩增试剂准备（PCR前准备区）

取N个（N=阴【yīn】性质【zhì】控品+待检样本+阳性【xìng】质控品）PCR反应管，每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶【méi】1 μl (也可根据每头份【fèn】用【yòng】量计算N+1份FMD RT-PCR反【fǎn】应液、RT-PCR酶所需总量【liàng】，两者混匀离心【xīn】后分【fèn】装20 μl至单个PCR反应管【guǎn】)。组分【fèn】每头份【fèn】用量FMD  RT-PCR反应【yīng】液19 μlRT-PCR酶。

1 .将所有【yǒu】PCR反应管于6,000rpm离【lí】心30s，转【zhuǎn】移至样本处理区。

2.马红球菌PCR检测试剂盒加样（样本处理区）

3.在上述的PCR反应管中分【fèn】别加入待【dài】检【jiǎn】样本RNA提取【qǔ】物、阴性质【zhì】控品和阳性质控【kòng】品各5 μl，盖紧管盖，于6,000rpm离心【xīn】10s，转【zhuǎn】移【yí】至扩增区。