吕氏泰勒虫PCR检测试剂盒

产品介绍：

产品名称：吕氏泰勒虫PCR检测试剂盒

英文名称：Theileria lowenshuniPCR

准备物品：

清理液（A）                                   毫【háo】升【shēng】

染色液（t B）                                 微升

稀【xī】释液【yè】（C）                                   毫升

溶解液【yè】（tD）                                  毫升

产品说明【míng】书【shū】                                    1份

注意事项：

1．基础程序。

2．扩增温度和延伸温度。

3．反应时间。

4．循环次数。

5．PCR 反应液的配制。

6．PCR技术的基本原理。

7．PCR的反应动力学。

8．PCR扩增产物。

9．PCR反应体系与反应条件。

反应五要素：

参加PCR反【fǎn】应的物质主要有五种即引物、酶【méi】、dNTP、模板【bǎn】和Mg2+

引物：引物是PCR特异性反应的关键，吕氏泰勒虫PCR检测试剂盒PCR 产【chǎn】物的特【tè】异性取决【jué】于引物与模板DNA互补的程【chéng】度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设【shè】计互补的【de】寡核苷酸链【liàn】做引物，利用【yòng】PCR就可将模板DNA在体外【wài】大量扩增。设计引物应遵循【xún】以下原则：

①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。

②引物【wù】扩增【zēng】跨度： 以200-500bp为宜，特定条【tiáo】件【jiàn】下可扩增长至10kb的片段。

③引物碱基：G+C含量以9-21%为宜，G+C太少【shǎo】扩增【zēng】效果不佳，G+C过多易出现非【fēi】特异条带。ATGC*随机分布，避【bì】免5个以上的嘌【piào】呤或嘧啶【dìng】核【hé】苷【gān】酸的成【chéng】串排列。

④避免引物内部出现二级结构【gòu】，避免两条引【yǐn】物间互补【bǔ】，特别是3'端【duān】的互补【bǔ】，否则会形成引物二聚体，产生非特【tè】异的扩增条带【dài】。

⑤引物3'端的碱基，特【tè】别是末及倒数【shù】第【dì】二个【gè】碱基，应严【yán】格要【yào】求配对，以避免【miǎn】因末端碱基不配对而导致【zhì】PCR失败。

⑥引物中有或能【néng】加上合适的【de】酶切【qiē】位点， 被扩增的【de】靶序列*有适宜的酶【méi】切位点【diǎn】， 这对酶切分析或分子克隆很有【yǒu】好处【chù】。

⑦引物的特异性：引物【wù】应与核酸序列数【shù】据库的其【qí】它序列无【wú】明【míng】显同源性。

引【yǐn】物【wù】量：每条引物的浓【nóng】度0.1～1umol或10～100pmol，以*引【yǐn】物量【liàng】产生【shēng】所【suǒ】需要的结果【guǒ】为好【hǎo】，引物浓度偏高会引起错【cuò】配和非特异性【xìng】扩增，且可增加引物【wù】之间形成二聚体的机会。