克氏锥虫PCR检测试剂盒

产品介绍：

产品名称：克氏锥虫PCR检测试剂盒

英文名称：Trypanosoma cruziPCR

组成及试剂配制:

1、 酶标板：一块（96孔）

2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请【qǐng】临用前【qián】15分钟内配制【zhì】。每【měi】瓶以样品稀释液稀释【shì】至0.5ml，盖好后室温静置【zhì】大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解【jiě】，其【qí】浓【nóng】度为200 U/L，然【rán】后【hòu】做系【xì】列倍【bèi】比稀释【shì】（注：不【bú】要直【zhí】接在板中进行倍【bèi】比【bǐ】稀释），分【fèn】别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品【pǐn】稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如【rú】配制100 U/L标【biāo】准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上【shàng】述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混【hún】匀即可，其余浓度以此类推。

3、 样品稀释液：1×20ml。

4、 检测稀释液A：1×10ml。

5、 检测稀释液B：1×10ml。

样本采集、存放及运输：

1、克氏锥虫PCR检测试剂盒样本采集：各类型样本按照常规方法采集。

2、存放：样本在2~8℃条【tiáo】件下保存应不超【chāo】过【guò】72h，-70℃以下【xià】可长期保存，但应【yīng】避免反复冻融【róng】（zui多【duō】冻融【róng】3次）。

3、运输：采用泡沫箱加冰密封进行运输。

特点优势：

1.特异性：所有【yǒu】产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分【fèn】析，经【jīng】过GenBank及自【zì】建【jiàn】庞【páng】大数据库的比对，确保所用的每一【yī】条引物均为种【zhǒng】属或血清【qīng】型【xíng】特【tè】异的基因序列区段【duàn】，可实现对种属【shǔ】及【jí】血清型的特异检测，特【tè】异【yì】性均达到【dào】100%。

2.重现【xiàn】性【xìng】：该系【xì】列所有产品均经过大【dà】量实验菌株的验证，重现性【xìng】为【wéi】100%。

3.灵【líng】敏性：该系【xì】列产品可【kě】实现【xiàn】对检测菌的高【gāo】灵敏检测，当样品中的【de】浓度达到103cfu/ml时，可【kě】实现对其的直接【jiē】检测，无需繁琐【suǒ】的增【zēng】菌过程。

4.实用性：检测范围广，涵盖【gài】了【le】对人体危害较为【wéi】严【yán】重【chóng】的17种呼吸道及肠道致病菌，可【kě】实现对临【lín】床样品及其他环境取样的快速检【jiǎn】测，整个【gè】检测【cè】过程为9-22个【gè】小时【shí】。

5.优势【shì】1：序列资源【yuán】丰富，除GenBank公布的序【xù】列外，公司还【hái】进行了大量菌株的序列【liè】破译，从理论上保证所【suǒ】选引物具【jù】有良好的保【bǎo】守性【xìng】和【hé】特异性。

6.优势2：该系列【liè】试剂盒均经【jīng】过大量的保守性【xìng】及特【tè】异性实验【yàn】验证，凭借公司拥有的丰【fēng】富的菌种资【zī】源，每一种检【jiǎn】测试剂盒均经【jīng】过了20余种标准菌株和【hé】临床菌株的保守【shǒu】性验证【zhèng】及【jí】40余种近缘标准【zhǔn】菌株和临床【chuáng】菌株的特异性验证，确保【bǎo】在使用过程【chéng】中不会出【chū】现任何的假阳性及假阴性报【bào】告【gào】结果。

使用方法：

注：所有试剂使用【yòng】前【qián】需【xū】*解冻，混合均【jun1】匀【yún】，6,000rpm离心数秒后使【shǐ】用。

1. 样本处理（样本处理区）

待【dài】检样本的核酸提取【qǔ】可采用【yòng】病毒RNA提取试剂盒【hé】或自动化核酸提取仪【yí】等，具体提取方法请参照相关说明书。阳【yáng】性【xìng】质控品及阴性质控品无需【xū】提取【qǔ】，可【kě】直接使用【yòng】。

2. 扩增试剂准备（PCR前准备区）

取N个（N=阴性质控【kòng】品+待检样本+阳性质控品）PCR反应管，每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根【gēn】据【jù】每头份用量计算【suàn】N+1份【fèn】FMD RT-PCR反【fǎn】应液【yè】、RT-PCR酶所需总量，两者混匀【yún】离心后分装20 μl至单个PCR反应【yīng】管)。组分每【měi】头份用量FMD  RT-PCR反应液【yè】19 μlRT-PCR酶。

1 .克氏锥虫PCR检测试剂盒将所有PCR反【fǎn】应管于6,000rpm离心30s，转移至样【yàng】本处【chù】理区。

2.加样（样本处理区）

3.在【zài】上述的PCR反应管【guǎn】中分别加入待检样【yàng】本RNA提取物【wù】、阴【yīn】性质控品和阳性【xìng】质【zhì】控品各5 μl，盖紧管盖，于6,000rpm离心10s，转移至扩【kuò】增区。