人前列腺癌细胞 （VCaP）

人前列腺癌细胞 (VCaP)
细胞介绍：
1997从一位【wèi】不受激素影响的前列腺癌患【huàn】者脊【jǐ】椎转移灶中建【jiàn】立【lì】了这株细胞。先在小鼠中进行异种移植传代，随后进行体【tǐ】外【wài】培养。体【tǐ】内【nèi】及体外都对雄性激素敏【mǐn】感。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 DMEM-H 培【péi】养基(DMEM-H，GIBCO，添加 NaHC031.5g/L)，90%;胎牛血清，10%。（DMEM 液体【tǐ】培【péi】养【yǎng】基：GIBCO，11995-065)。
2.培养条件【jiàn】：气相【xiàng】：空气，95%;二氧化碳，5%。温度：37摄【shè】氏度，培养箱【xiāng】湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%*培【péi】养基，10%DMSO,现用现配【pèi】。液氮【dàn】储【chǔ】存。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将含有lmL细胞悬液的冻存管【guǎn】在37°C水浴【yù】中迅速摇晃【huǎng】解冻，加入【rù】4mL培养基混合均匀。在1000RPM条【tiáo】件【jiàn】下【xià】离心4分【fèn】钟，弃去上【shàng】清液，补加l-2mL培养基后【hòu】吹匀【yún】。然后将【jiāng】所有【yǒu】细胞悬液加入培养【yǎng】瓶中培养过夜（或将【jiāng】细胞悬液加入l〇cm皿中，加入约8ml培养【yǎng】基，培养过夜【yè】）。第【dì】二天换液并【bìng】检查细【xì】胞【bāo】密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人前列腺癌细胞 (VCaP)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培【péi】养上清，用不含钙、镁【měi】离子的PBS润洗【xǐ】细胞9-21次。力口2m丨消【xiāo】化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培【péi】养瓶中【zhōng】，置于37°C培养箱中消化【huà】9-21分钟【zhōng】，然后【hòu】在显微【wēi】镜下观【guān】察【chá】细胞消化【huà】情况【kuàng】，若细【xì】胞大部分变【biàn】圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲【qiāo】几下培养瓶后加少量培养基终止消化。按6-8ml/瓶【píng】补【bǔ】加【jiā】培养【yǎng】基，轻轻打匀后吸【xī】出【chū】，在1000RPM条件下离心4分钟【zhōng】，弃去上清【qīng】液，补加l-2mL培养液后吹匀。将【jiāng】细胞悬【xuán】液按1: 2到1: 5的比例分到新的【de】含【hán】8ml培养基的新皿中或者瓶中【zhōng】。
 
细胞冻【dòng】存【cún】：待细【xì】胞生长状态良【liáng】好时【shí】，可进行【háng】细【xì】胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培【péi】养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约lml含【hán】血清的培养基【jī】后 加入【rù】冻【dòng】存管中【zhōng】，再添加【jiā】1〇%DMSO后进行冻存。

注意事项：
收到细【xì】胞后，若发现干冰【bīng】己【jǐ】挥发干净【jìng】、冻存【cún】管瓶盖脱落【luò】、破损及细胞【bāo】有污染，请立即与我们电联。
所【suǒ】有【yǒu】动物细胞均视为【wéi】有潜在的生物危【wēi】害性，必须在二级生【shēng】物【wù】安全【quán】台内【nèi】操作【zuò】，并请注意防护【hù】，所有废【fèi】液及接触过此细胞【bāo】的器皿需要灭菌后方能丢弃。
 
细胞特性：
1)来源：前列腺癌
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人前列腺癌细胞 (VCaP)运输和保存：使用含有胎牛血清【qīng】的2ml冻存管发【fā】送存【cún】活细胞。收到细胞后，可在1000RPM，常温【wēn】条【tiáo】件下，离【lí】心【xīn】5min后【hòu】，于洁净【jìng】操作台弃去上【shàng】清，加入推荐使用【yòng】的培养基后转移至l〇cm培养皿或者【zhě】T75培养【yǎng】瓶中培养，传代达到细胞生长状态良好时【shí】，再【zài】进行冻存。具体操【cāo】作【zuò】见细【xì】胞培养步骤。
细胞用途：仅供使用。