人舌鱗癌细胞（Tca-8113）

人舌鱗癌细胞(Tca-8113)
细胞介绍：
Tca-8113源自属于【yú】I级鳞癌(T2NlAmo, II stage)的原位舌癌的活组【zǔ】织检【jiǎn】查切片。通过【guò】干贴壁方法建立于1987年，传代时间为38小时。传代【dài】第【dì】三天【tiān】有丝分裂指数为61%，移植效率为86%，软琼【qióng】脂克隆【lóng】率为【wéi】9-21.7%。ATS处理【lǐ】后【hòu】在【zài】ICR和C57B1
小鼠中成瘤。电镜和组化特征与鳞癌相符。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准【zhǔn】备 RPIVM-1640 培【péi】养基(RPIVM-1640:GIBCO,添加 NaHC031.5g八, D-葡萄糖2.5g八，丙酮【tóng】酸钠O.llg八)，80%;胎【tāi】牛血清，20%。
2. 培养条件【jiàn】：气相：空【kōng】气，95%;二氧化碳【tàn】，5%。温度：37摄氏【shì】度，培养箱湿度【dù】为70%-80%。
3.冻【dòng】存液：90%*培养基，10%DMSO,现【xiàn】用现配。液氮储存【cún】。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将【jiāng】含有【yǒu】lmL细胞悬液【yè】的【de】冻存管在37°C水浴中迅【xùn】速摇晃解冻，加入4mL培养基混【hún】合均【jun1】匀【yún】。在1000RPM条件【jiàn】下【xià】离心4分钟，弃去上清【qīng】液，补加l-2mL培养基后吹【chuī】匀【yún】。然后将所有细胞悬【xuán】液加入培【péi】养瓶【píng】中培养过夜（或将细胞悬液加入l〇cm皿中【zhōng】，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细【xì】胞密【mì】度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人舌鱗癌细胞(Tca-8113)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃【qì】去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润【rùn】洗细胞9-21次。力口【kǒu】2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养【yǎng】瓶中，置于37°C培养箱中消化【huà】9-21分钟，然后在显微【wēi】镜【jìng】下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆【yuán】并脱落，迅速【sù】拿回操【cāo】作台，轻敲几下【xià】培养瓶后加【jiā】少量培【péi】养基终止消化。按【àn】6-8ml/瓶补加培养【yǎng】基，轻【qīng】轻打匀后吸出【chū】，在1000RPM条【tiáo】件下离心【xīn】4分钟，弃去上清液，补加l-2mL培养液后【hòu】吹【chuī】匀。将细胞悬液按1: 2到1: 5的比例【lì】分到新【xīn】的含8ml培养基的新【xīn】皿中或者瓶中【zhōng】。
 
细胞冻【dòng】存：待细【xì】胞生长状【zhuàng】态良【liáng】好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时【shí】，弃去培养基【jī】后【hòu】加入【rù】少量胰酶，细胞变圆【yuán】脱【tuō】落后，加【jiā】入约lml含血清的培养基后加入冻存管中，再【zài】添加1〇%DMSO后进行【háng】冻存。
 
注意事项：
收到【dào】细胞【bāo】后，若发现干冰己挥【huī】发干净、冻存管瓶盖【gài】脱落、破损及细胞有污染，请【qǐng】立【lì】即与我们【men】电联。
所有动【dòng】物【wù】细胞均视为【wéi】有潜在的生物危害【hài】性，必须【xū】在二【èr】级生物安全台内操作，并【bìng】请注意防护，所有废液及【jí】接触过【guò】此细胞的器皿需要灭菌后【hòu】方能丢弃。
 
细胞特性：
1)来源：舌癌
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人舌鱗癌细胞(Tca-8113)运输和保存：使用含有胎牛血清的2ml冻【dòng】存管发送存活细胞。收【shōu】到【dào】细胞后，可在1000RPM，常温条件下，离心5min后【hòu】，于洁净操作台弃去上清，加入推荐使用的【de】培养【yǎng】基后转【zhuǎn】移至l〇cm培养皿或者T75培【péi】养瓶中【zhōng】培养，传【chuán】代【dài】达到细胞生长状态良【liáng】好时，再进行【háng】冻存【cún】。具【jù】体操作见细【xì】胞【bāo】培养步骤。
细胞用途：仅供使用。