罗斯肉瘤病毒PCR检测试剂盒

产品介绍：

产品名称：罗斯肉瘤病毒PCR检测试剂盒

英【yīng】文名称：Rous′ Sarcoma Virus(RSV)RTPCR

组成及试剂配制:

1、 酶标板：一块（96孔）

2、 标准品（冻【dòng】干【gàn】品）： 2瓶【píng】，请【qǐng】临【lín】用前15分钟【zhōng】内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖【gài】好【hǎo】后室温【wēn】静置大约10分钟【zhōng】，同时反复颠【diān】倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板【bǎn】中进行【háng】倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样【yàng】品稀【xī】释液直【zhí】接作为空白孔 0 U/L。如配制【zhì】100 U/L标准品【pǐn】：取【qǔ】0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品【pǐn】加入含有0.3ml样【yàng】品稀释液的Eppendorf管中【zhōng】，混【hún】匀即可，其余浓度以此类推。

3、 样品稀释液：1×20ml。

4、 检测稀释液A：1×10ml。

5、 检测稀释液B：1×10ml。

样本采集、存放及运输：
1、样本采集：各类型样本按照常规方法采集。

2、罗斯肉瘤病毒PCR检测试剂盒存放：样本【běn】在2~8℃条件下保【bǎo】存应不超过72h，-70℃以下可【kě】长期保存，但应避免反复冻【dòng】融（zui多冻【dòng】融【róng】3次【cì】）。

3、运输：采用泡沫箱加冰密封进行运输。

特点优势：

1.特异性【xìng】：所有【yǒu】产【chǎn】品使【shǐ】用【yòng】的【de】引物【wù】均经过详【xiáng】尽的生物信息学分【fèn】析，经过GenBank及自【zì】建庞【páng】大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对种属【shǔ】及血清型的特异检测，特【tè】异【yì】性均达到【dào】100%。

2.重【chóng】现【xiàn】性【xìng】：该系列所有产品均经过大量实【shí】验菌株的验证，重现性为【wéi】100%。

3.灵敏性：该系列产【chǎn】品可实现【xiàn】对检测【cè】菌的高灵敏【mǐn】检测，当样品中【zhōng】的【de】浓度达到103cfu/ml时【shí】，可实【shí】现【xiàn】对其的直【zhí】接检测，无需繁琐的增菌过程。

4.实用性：检测范围广，涵盖【gài】了【le】对人体危害较为【wéi】严重【chóng】的17种呼吸【xī】道【dào】及肠道致病菌，可实现对【duì】临床样品及其他环境取【qǔ】样的快速检测，整个检测【cè】过【guò】程为9-21个小时【shí】。

5.优势【shì】1：序列【liè】资源丰富，除【chú】GenBank公布的序列外，公【gōng】司还【hái】进行了大量菌株的【de】序列破译，从理论上保证所选【xuǎn】引物具有良【liáng】好的保【bǎo】守性和特异性。

6.优势【shì】2：该系列试剂盒均经过【guò】大量【liàng】的保【bǎo】守性及【jí】特异性实验验证，凭借【jiè】公司拥有的丰富的菌种资源【yuán】，每一种检测试剂盒【hé】均经过了【le】20余种标准菌株和临床菌株【zhū】的保守性【xìng】验【yàn】证及40余种近缘标准菌株和临【lín】床菌株的特异【yì】性【xìng】验证，确保在【zài】使用过程中不会出现【xiàn】任何的假【jiǎ】阳性及【jí】假阴性报【bào】告【gào】结【jié】果。

使用方法：

注：所【suǒ】有试剂【jì】使用前需*解冻，混合均【jun1】匀，6,000rpm离【lí】心数秒【miǎo】后使用。

1. 样本处理（样本处理区）

待检样【yàng】本的核酸提取可采用病毒RNA提取试【shì】剂盒或自【zì】动化核酸提【tí】取【qǔ】仪等【děng】，具体提取方法请【qǐng】参照相【xiàng】关说明书。阳【yáng】性质控【kòng】品及阴性质控品无需【xū】提取【qǔ】，可直接使用。

2. 扩增试剂准备（PCR前准备区）

取N个（N=阴性质控品+待检样本+阳【yáng】性质控品）PCR反应管，每管分别加入FMD RT-PCR反【fǎn】应液19μl、RT-PCR酶【méi】1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应【yīng】液、RT-PCR酶所需总【zǒng】量，两者【zhě】混匀离心【xīn】后分装20 μl至单个PCR反应管)组分每【měi】头份用量FMD  RT-PCR反应【yīng】液19 μlRT-PCR酶。

1 .将【jiāng】所有PCR反应管【guǎn】于【yú】6,000rpm离心30s，转移至样本【běn】处理区【qū】。

2.罗斯肉瘤病毒PCR检测试剂盒加样（样本处理区）

3.在上述【shù】的PCR反应管中分别加【jiā】入待检样本RNA提取物【wù】、阴性质控品和阳性质控【kòng】品各5 μl，盖【gài】紧管盖【gài】，于【yú】6,000rpm离心10s，转【zhuǎn】移至扩增区。