口腔链球菌PCR检测试剂盒

产品介绍：

产品名称：口腔链球菌PCR检测试剂盒

英文名称：Streptococcus oralisPCR

准备物品：

清理【lǐ】液【yè】（A）                                   毫升

染【rǎn】色液（t B）                                 微升【shēng】

稀释液【yè】（C）                                   毫【háo】升

溶解液（tD）                                  毫升

产品说【shuō】明书                                     1份

注意事项：

1．基础程序。

2．扩增温度和延伸温度。

3．反应时间。

4．循环次数。

5．PCR 反应液的配制。

6．PCR技术的基本原理。

7．PCR的反应动力学。

8．PCR扩增产物。

9．PCR反应体系与反应条件。

反应五要素：

参【cān】加PCR反【fǎn】应【yīng】的物质主要【yào】有五种即引物、酶、dNTP、模板和【hé】Mg2+

引物：引物是PCR特异性反应的关键，口腔链球菌PCR检测试剂盒PCR 产物的特异【yì】性【xìng】取决【jué】于引物与模板DNA互补的程【chéng】度【dù】。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其【qí】设计互【hù】补的寡核苷酸【suān】链做引物，利用【yòng】PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计【jì】引【yǐn】物应遵【zūn】循以下原【yuán】则：

①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。

②引物扩增跨【kuà】度： 以200-500bp为【wéi】宜，特定条件下【xià】可扩【kuò】增长至10kb的片段【duàn】。

③引物碱基：G+C含量以9-22%为宜，G+C太少扩增效果【guǒ】不佳，G+C过多易【yì】出现【xiàn】非特异条带。ATGC*随【suí】机分布，避免5个以上【shàng】的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串【chuàn】排列【liè】。

④避免引物内【nèi】部出现二【èr】级结构，避【bì】免两条引物间互补，特别【bié】是3'端的互补【bǔ】，否则会形成引【yǐn】物二聚体，产生非【fēi】特异【yì】的扩增【zēng】条带。

⑤引物3'端的【de】碱基【jī】，特别【bié】是【shì】末及倒数第二个碱基，应【yīng】严格要求配对，以避免因【yīn】末【mò】端碱基不配对而导致PCR失败【bài】。

⑥引物中【zhōng】有或能加上合适【shì】的酶切位【wèi】点， 被扩增的靶序列*有适【shì】宜的酶【méi】切位点， 这【zhè】对【duì】酶切【qiē】分【fèn】析或分子克隆【lóng】很有好处。

⑦引物的特异【yì】性：引物【wù】应与核酸序列【liè】数据库的其它序列无明【míng】显【xiǎn】同源性【xìng】。

引物量：每条引【yǐn】物的浓度【dù】0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生【shēng】所需要的结果为【wéi】好，引物浓度偏高会引起错【cuò】配【pèi】和非【fēi】特异性扩【kuò】增，且可增加引【yǐn】物之间形成二【èr】聚体的机会。