柯拉松血吸虫PCR检测试剂盒

产品介绍：

产品名称：柯拉松血吸虫PCR检测试剂盒

英文名称：Schistosoma curassoniPCR

准备物品：

清理液【yè】（A）                                   毫升

染色【sè】液（t B）                                 微升

稀【xī】释液（C）                                   毫升

溶解液【yè】（tD）                                  毫升

产品【pǐn】说【shuō】明书                                     1份

注意事项：

1．基础程序。

2．扩增温度和延伸温度。

3．反应时间。

4．循环次数。

5．PCR 反应液的配制。

6．PCR技术的基本原理。

7．PCR的反应动力学。

8．PCR扩增产物。

9．PCR反应体系与反应条件。

反应五要素：

参加PCR反应的物质主要有【yǒu】五【wǔ】种即引物【wù】、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特异性反应的关键，柯拉松血吸虫PCR检测试剂盒PCR 产【chǎn】物的特异性取决于引【yǐn】物与模【mó】板DNA互补【bǔ】的程度。理论上，只要【yào】知道任何一【yī】段【duàn】模【mó】板DNA序列， 就【jiù】能按其设计互补的寡【guǎ】核苷酸【suān】链做引物【wù】，利用【yòng】PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物【wù】应遵循以下原则：

①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。

②引物扩增【zēng】跨度： 以200-500bp为宜，特【tè】定条【tiáo】件【jiàn】下可扩增长至10kb的片段。

③引物碱基：G+C含量【liàng】以9-22%为宜，G+C太少【shǎo】扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异【yì】条带。ATGC*随【suí】机分布，避免5个以上的嘌【piào】呤或嘧啶核苷酸【suān】的【de】成串排列【liè】。

④避免【miǎn】引【yǐn】物内部出现二级结【jié】构，避免两条引物间互补【bǔ】，特别是3'端的【de】互补，否则会形成引物【wù】二聚【jù】体，产生非特异【yì】的【de】扩增条带。

⑤引物3'端的碱基，特别是末及倒数第二【èr】个碱基，应严格要求配对【duì】，以避免【miǎn】因【yīn】末【mò】端【duān】碱基【jī】不配对而导致PCR失败。

⑥引物中【zhōng】有或能加上合【hé】适【shì】的酶切位点， 被扩【kuò】增的靶序列*有适宜的酶【méi】切位【wèi】点【diǎn】， 这对酶切分析或分子克【kè】隆很有好处【chù】。

⑦引物的特异性：引物【wù】应与核酸序列【liè】数据库【kù】的【de】其【qí】它序列无明显同源性。

引【yǐn】物量：每条引物的浓度【dù】0.1～1umol或【huò】10～100pmol，以*引物量产生【shēng】所【suǒ】需要的【de】结果为好，引物浓度偏高会引起错【cuò】配和非特异性【xìng】扩增，且可【kě】增【zēng】加引物之间形成二聚体的机【jī】会。