马sheng殖泰勒氏菌PCR检测试剂盒

产品介绍：

产品名称：马sheng殖泰勒氏菌PCR检测试剂盒

英文名称【chēng】：Taylorella equigenitalisPCR

准备物品：

清【qīng】理【lǐ】液（A）                                   毫升

染色【sè】液（t B）                                 微【wēi】升

稀【xī】释液【yè】（C）                                   毫升

溶解液【yè】（tD）                                  毫升

产品说【shuō】明书                                     1份

注意事项：

1．基础程序。

2．扩增温度和延伸温度。

3．反应时间。

4．循环次数。

5．PCR 反应液的配制。

6．PCR技术的基本原理。

7．PCR的反应动力学。

8．PCR扩增产物。

9．PCR反应体系与反应条件。

反应五要素：

参加PCR反应的物质主要有【yǒu】五种【zhǒng】即引物、酶、dNTP、模板和【hé】Mg2+

引物：引物是PCR特异性反应的关键，马sheng殖泰勒氏菌PCR检测试剂盒PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理【lǐ】论上，只要知【zhī】道任何一【yī】段模板DNA序列， 就能按【àn】其设【shè】计【jì】互补的寡【guǎ】核苷【gān】酸链做引【yǐn】物，利用PCR就可【kě】将模板DNA在体【tǐ】外大量扩增。设计【jì】引物应遵循以下原【yuán】则：

①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。

②引物扩增跨度： 以200-500bp为【wéi】宜，特【tè】定条【tiáo】件下可扩增长至【zhì】10kb的片段。

③引物碱基：G+C含量【liàng】以【yǐ】9-21%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过【guò】多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的【de】嘌呤或【huò】嘧啶核苷酸的【de】成串排列。

④避免引物【wù】内部出现二级结构，避【bì】免两条引【yǐn】物间互补，特别是3'端【duān】的互补，否则会形【xíng】成引物二聚【jù】体【tǐ】，产【chǎn】生【shēng】非【fēi】特异的扩增条带。

⑤引物3'端【duān】的碱基，特别是末及倒【dǎo】数第二个【gè】碱基【jī】，应严格要求配【pèi】对，以避免因末端碱基【jī】不配对而导致PCR失败。

⑥引物中有或能加上合适的【de】酶【méi】切位【wèi】点， 被扩增的靶序列*有【yǒu】适宜的酶切位【wèi】点， 这对酶切分析或【huò】分子【zǐ】克【kè】隆很有好【hǎo】处。

⑦引【yǐn】物的特异性：引【yǐn】物【wù】应与核酸【suān】序列数据库的其它序列无明【míng】显同源性。

引物【wù】量：每条引物的浓【nóng】度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需【xū】要的结果为好，引【yǐn】物浓度偏高【gāo】会引起错【cuò】配和非特异性扩增，且可增加引物之间【jiān】形【xíng】成二【èr】聚体的【de】机【jī】会。