裂谷热病毒PCR检测试剂盒

产品介绍：

产品名称：裂谷热病毒PCR检测试剂盒

英【yīng】文名称：Rift Valley Fever Virus(RVFV)RTPCR

组成及试剂配制:

1、 酶标板：一块（96孔）

2、 标准品【pǐn】（冻干品）： 2瓶，请临用前15分【fèn】钟内配制。每瓶以样品稀释【shì】液稀释至0.5ml，盖好【hǎo】后室温静【jìng】置大约【yuē】10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系【xì】列【liè】倍比稀释（注：不要直接在板【bǎn】中进行倍【bèi】比【bǐ】稀释【shì】），分别配【pèi】制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀【xī】释液直接【jiē】作为空【kōng】白孔 0 U/L。如【rú】配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的【de】Eppendorf管中，混匀即【jí】可，其【qí】余【yú】浓度以此类【lèi】推。

3、 样品稀释液：1×20ml。

4、 检测稀释液A：1×10ml。

5、 检测稀释液B：1×10ml。

样本采集、存放及运输：
1、样本采集：各类型样本按照常规方法采集。

2、裂谷热病毒PCR检测试剂盒存放：样本【běn】在2~8℃条件下保存应不超过72h，-70℃以【yǐ】下【xià】可长期保存，但【dàn】应避免反复【fù】冻融（zui多冻融【róng】3次）。

3、运输：采用泡沫箱加冰密封进行运输。

特点优势：

 1.特异性【xìng】：所有产品使用的引物【wù】均【jun1】经过详尽的生物信息【xī】学分析【xī】，经【jīng】过GenBank及自建庞大数【shù】据库的【de】比对，确保所【suǒ】用的每【měi】一条引物均为种属或【huò】血清型特异的基因序列区段，可实现对种属及血清【qīng】型【xíng】的【de】特异检测，特异性【xìng】均【jun1】达到100%。

 2.重现性：该系列所有【yǒu】产【chǎn】品均经过大量实验【yàn】菌株【zhū】的验【yàn】证，重现性为100%。

 3.灵敏【mǐn】性：该系列产品可实现对【duì】检测【cè】菌【jun1】的高灵敏检测，当【dāng】样品中的浓度达【dá】到103cfu/ml时，可【kě】实现对其【qí】的直接检测【cè】，无需繁琐的增菌过【guò】程。

 4.实用性【xìng】：检测【cè】范围广【guǎng】，涵盖了对【duì】人体【tǐ】危害较为严重的17种呼吸道及【jí】肠【cháng】道致病菌，可实【shí】现对临床样品及其他环境【jìng】取样的快【kuài】速检测，整个检测过程【chéng】为9-21个【gè】小时。

 5.优势1：序【xù】列资源丰富【fù】，除GenBank公【gōng】布【bù】的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上【shàng】保证所选【xuǎn】引物具有良好的保守【shǒu】性和【hé】特异性【xìng】。

 6.优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及【jí】特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌【jun1】种【zhǒng】资【zī】源【yuán】，每一种检【jiǎn】测【cè】试剂盒均经过了20余种标准【zhǔn】菌【jun1】株和临床菌株【zhū】的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的【de】特【tè】异性【xìng】验证，确保在【zài】使用过程中【zhōng】不会【huì】出【chū】现任何【hé】的【de】假阳【yáng】性及假阴性【xìng】报告结果。

使用方法：

注：所有试剂使用前需*解冻，混合均匀，6,000rpm离【lí】心【xīn】数【shù】秒后使用。

1. 样本处理（样本处理区）

待检样本【běn】的核【hé】酸【suān】提取可【kě】采【cǎi】用病毒RNA提取试剂【jì】盒或自动化核酸提【tí】取仪等，具体提取方法请参照相关说明书。阳【yáng】性【xìng】质控品及阴性【xìng】质控品【pǐn】无需提取，可直接使用。

2. 扩增试剂准备（PCR前准备区）

取N个（N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品）PCR反应管，每【měi】管分【fèn】别【bié】加【jiā】入【rù】FMD RT-PCR反【fǎn】应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可【kě】根【gēn】据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应【yīng】液、RT-PCR酶所需总【zǒng】量，两者混【hún】匀离心后【hòu】分装20 μl至单个PCR反应管)。组分每头份用【yòng】量FMD  RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。

1 .将所有【yǒu】PCR反应管【guǎn】于6,000rpm离心【xīn】30s，转【zhuǎn】移至【zhì】样本处理区。

2.裂谷热病毒PCR检测试剂盒加样（样本处理区）

3.在上述的PCR反应【yīng】管中分别加入待检样【yàng】本RNA提取【qǔ】物、阴【yīn】性质控【kòng】品和【hé】阳性质【zhì】控【kòng】品各5 μl，盖紧管盖，于6,000rpm离心10s，转移至扩增区。