里氏立克次氏体PCR检测试剂盒

产品介绍：

产品名称：里氏立克次氏体PCR检测试剂盒

英文名称：Rickettsia risticiiPCR

组成及试剂配制:

1、 酶标板：一块（96孔）

2、 标准品【pǐn】（冻【dòng】干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀【xī】释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分【fèn】钟【zhōng】，同时反复颠倒/搓动以【yǐ】助溶【róng】解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍【bèi】比稀释（注：不要直【zhí】接【jiē】在【zài】板【bǎn】中进行倍比稀释），分【fèn】别【bié】配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔【kǒng】 0 U/L。如配【pèi】制100 U/L标准品【pǐn】：取0.3ml （不要【yào】少于0.3ml ）200 U/L的上述【shù】标准【zhǔn】品加入含有0.3ml样【yàng】品稀释液的Eppendorf管中【zhōng】，混匀即可，其余浓度以【yǐ】此【cǐ】类推。

3、 样品稀释液：1×20ml。

4、 检测稀释液A：1×10ml。

5、 检测稀释液B：1×10ml。

样本采集、存放及运输：

1、里氏立克次氏体PCR检测试剂盒样本采集：各类型样本按照常规方法采集。

2、存放【fàng】：样本在2~8℃条件下保存应不超过72h，-70℃以【yǐ】下可长期保【bǎo】存，但应避【bì】免反复冻融（zui多冻【dòng】融3次）。

3、运输：采用泡沫箱加冰密封进行运输。

特点优势：

1.特【tè】异性：所有产品使用【yòng】的【de】引物【wù】均经【jīng】过详尽【jìn】的生物信【xìn】息学分析【xī】，经过GenBank及自【zì】建庞【páng】大【dà】数据库【kù】的比对，确保【bǎo】所用【yòng】的每一条引物均为种属或血清型【xíng】特异的基因序列区段，可实现对种属及血清型的特异检测，特异【yì】性均达【dá】到100%。

2.重现【xiàn】性：该系【xì】列所有产品均经过大量实【shí】验菌株【zhū】的【de】验证，重现性为100%。

3.灵敏性【xìng】：该系列产品可实现对【duì】检测菌的高灵敏检测，当【dāng】样品中的浓度达【dá】到103cfu/ml时，可实现【xiàn】对其的直接【jiē】检测，无需繁琐【suǒ】的【de】增菌【jun1】过程。

4.实用性【xìng】：检测范围广【guǎng】，涵盖了对【duì】人体危害较为严【yán】重的17种呼吸道及肠道【dào】致病菌【jun1】，可实【shí】现对临【lín】床样品及【jí】其他【tā】环境取样的快速检测，整个检测过程【chéng】为9-21个小时。

5.优势1：序列资源丰富，除【chú】GenBank公布的序列【liè】外，公【gōng】司还【hái】进【jìn】行了大量【liàng】菌【jun1】株的序列破译，从理论【lùn】上保证所选引物具【jù】有良好的保守性和特异性。

6.优势2：该系列试【shì】剂盒均经过大量的【de】保守性及特异性实验验证，凭【píng】借【jiè】公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂【jì】盒均经过了20余种标准【zhǔn】菌株和临床菌株的【de】保守【shǒu】性验证及40余【yú】种近缘标准菌株【zhū】和【hé】临【lín】床菌株的【de】特异性验证，确【què】保在【zài】使用【yòng】过【guò】程中不会出现任何【hé】的【de】假阳【yáng】性【xìng】及假阴性报告结果。

使用方法：

注：所有试剂使【shǐ】用前【qián】需*解冻，混合【hé】均匀，6,000rpm离心【xīn】数秒后使用【yòng】。

1. 样本处理（样本处理区）

待检样本的核【hé】酸提取【qǔ】可采【cǎi】用病毒RNA提取试剂【jì】盒或【huò】自动化核酸【suān】提取仪【yí】等【děng】，具体提取方法【fǎ】请参照【zhào】相关说明书。阳性质控品及阴性质控品无需提取，可直【zhí】接使【shǐ】用。

2. 扩增试剂准备（PCR前准备区）

取N个【gè】（N=阴性质控品+待检【jiǎn】样本+阳性质控【kòng】品）PCR反应管，每管分别加【jiā】入FMD RT-PCR反应【yīng】液19μl、RT-PCR酶【méi】1 μl (也可根据每头份用【yòng】量计【jì】算N+1份FMD RT-PCR反应【yīng】液、RT-PCR酶所需【xū】总【zǒng】量，两者混匀离心后分【fèn】装20 μl至单个PCR反【fǎn】应管【guǎn】)。组分每头份【fèn】用量FMD  RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶【méi】。

1 .将所有PCR反【fǎn】应管于6,000rpm离心【xīn】30s，转移至【zhì】样本处理【lǐ】区。

2.里氏立克次氏体PCR检测试剂盒加样（样本处理区）

3.在上述的PCR反【fǎn】应管中【zhōng】分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳【yáng】性质控品各【gè】5 μl，盖紧管盖【gài】，于6,000rpm离心10s，转移至扩增区。