大鼠 ICAM3 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 ICAM3 ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用前将各种试剂【jì】取【qǔ】出放置30分钟，平衡至室温，所有标准品和样品【pǐn】必需【xū】设置平行对照实【shí】验，快速【sù】加【jiā】入试剂至样品【pǐn】中，立即漩涡【wō】震荡【dàng】2秒混匀。

1. 依【yī】据【jù】实验键盘纸决定酶标条【tiáo】的使用量，将【jiāng】剩余的酶标条连同干燥剂【jì】一起【qǐ】放回密封【fēng】塑料袋【dài】，密封，4℃保【bǎo】存。

2. 移取50μL中和液至各个微孔中，除了TA（全活【huó】性）孔【kǒng】和Blank（空白【bái】）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至NSB(非【fēi】特异结合)孔和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准【zhǔn】品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至【zhì】NSB（非特异结合）孔。

7. 移取50μL 偶联酶至各孔中，除了TA（全活【huó】性）孔和Blank（空白）孔。

8. 移取50μL 抗【kàng】体【tǐ】工作【zuò】液至各孔中，除了TA（全活性）孔【kǒng】、Blank（空白【bái】）孔和NSB（非特异结合【hé】）孔。

9. 将【jiāng】酶【méi】标孔【kǒng】置于孔【kǒng】板振动器【qì】上，250~500rpm，室温孵育2小时。

10. 在吸水纸上拍【pāi】干【gàn】微孔【kǒng】内溶液，加洗涤液400μL每【měi】孔洗3次，每次【cì】需拍【pāi】干。

11. 后一次洗涤，清空各【gè】微孔，在【zài】干【gàn】净的无【wú】尘吸水纸上轻巧酶标板数次【cì】，以确保【bǎo】没有洗【xǐ】涤液残【cán】留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每【měi】孔200μL显色底【dǐ】物溶液，于室温静置5~30分【fèn】钟【zhōng】。（显色底物A和B需在临用前【qián】15分钟【zhōng】内等体【tǐ】积混合，并避【bì】光【guāng】放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清【qīng】除酶标【biāo】仪Blank（空白）孔值，读取450nm处的光密度值，在【zài】570nm至590nm之间好有修正【zhèng】，如果酶标【biāo】仪不能自动清除Blank(空白【bái】)孔值【zhí】，那【nà】么手【shǒu】动扣【kòu】除每【měi】个读数的Blank（空白）孔光密度值。

注意事项：

1. 用户在【zài】初次使【shǐ】用试剂盒时【shí】，应将各种试【shì】剂管【guǎn】离【lí】心数【shù】分钟，以便试剂集中到管底。

2. 每次实验留【liú】一【yī】孔作为空白【bái】调零孔，该孔不加任何【hé】试剂，只是zui后【hòu】加【jiā】底物溶液及【jí】2N H2SO4，测量时先用此孔调OD值至零。

3. 为防【fáng】止样【yàng】品蒸发，试验时将反应板放于铺【pù】有湿【shī】布的密闭盒内，酶【méi】标板【bǎn】加上盖或覆膜。

4. 未使用完【wán】的酶【méi】标板或者试【shì】剂，请于9-21℃保【bǎo】存，标准【zhǔn】品【pǐn】、生物-素标记抗体工【gōng】作【zuò】液、辣【là】根过【guò】氧化物酶标【biāo】记亲和素工作【zuò】液请依据所需的量配置【zhì】使【shǐ】用，请勿重复使用已稀释过的标准品、生物-素标记抗【kàng】体【tǐ】工作液或【huò】、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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