大鼠BMPRⅡ ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠BMPRⅡ ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用【yòng】前将各种试剂取出放置30分钟，平衡【héng】至室温【wēn】，所有标准【zhǔn】品和【hé】样品必需设置平行对照实验，快速加【jiā】入【rù】试剂至样品中，立即漩涡震荡2秒【miǎo】混【hún】匀【yún】。

1. 依据实【shí】验键盘纸【zhǐ】决【jué】定酶标条的【de】使用量，将剩余的酶【méi】标条连同干【gàn】燥剂一起放回密封塑料袋，密【mì】封，4℃保【bǎo】存。

2. 移取50μL中和液至各个【gè】微孔中，除【chú】了TA（全活【huó】性）孔和Blank（空【kōng】白【bái】）孔。

3. 移【yí】取100μL 0.1M HCl至NSB(非特异结合)孔【kǒng】和B0孔【kǒng】（0 pmol/mL cAMP标【biāo】准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移【yí】取50μL 0.1M HCl至NSB（非【fēi】特【tè】异结合）孔。

7. 移取50μL 偶【ǒu】联酶至【zhì】各孔中，除了【le】TA（全活【huó】性）孔和Blank（空白）孔【kǒng】。

8. 移【yí】取50μL 抗【kàng】体【tǐ】工【gōng】作液至【zhì】各孔中【zhōng】，除【chú】了TA（全活性）孔、Blank（空白）孔和【hé】NSB（非特异结合）孔。

9. 将酶标【biāo】孔置于【yú】孔板振动【dòng】器上，250~500rpm，室温孵育2小时。

10. 在吸水纸上【shàng】拍干微孔【kǒng】内【nèi】溶液，加洗涤液400μL每【měi】孔洗3次，每次【cì】需拍干。

11. 后一次洗涤，清空【kōng】各【gè】微【wēi】孔【kǒng】，在干净的【de】无【wú】尘吸水纸上轻巧酶标板数次【cì】，以确【què】保没有洗涤液残留。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔【kǒng】200μL显【xiǎn】色底物溶液，于【yú】室温静置5~30分钟。（显色底物A和B需在临用前【qián】15分钟内【nèi】等【děng】体【tǐ】积混合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪Blank（空白【bái】）孔值，读取450nm处的光密度值【zhí】，在【zài】570nm至590nm之间好有【yǒu】修【xiū】正，如果酶标仪不能自动清除Blank(空【kōng】白)孔值，那么手动扣除每个读数的【de】Blank（空白【bái】）孔【kǒng】光密【mì】度值。

注意事项：

1. 用户在初【chū】次使用【yòng】试【shì】剂盒【hé】时，应将各种试【shì】剂管离心数分【fèn】钟，以便试【shì】剂集中到管底。

2. 每次【cì】实验留一孔作为空白【bái】调零【líng】孔，该孔不加任何试剂【jì】，只【zhī】是zui后加底物【wù】溶液及【jí】2N H2SO4，测量时先用此孔调OD值至零。

3. 为防止样品蒸发，试验时将【jiāng】反应板放于铺有【yǒu】湿布的密闭【bì】盒【hé】内，酶标板加上盖【gài】或覆【fù】膜【mó】。

4. 未【wèi】使用完的酶标板【bǎn】或【huò】者试剂，请于9-21℃保存，标准品【pǐn】、生物-素标记【jì】抗【kàng】体工作液、辣【là】根过氧化物酶标记【jì】亲和【hé】素【sù】工作液请依据所需的量配置使用，请勿重【chóng】复使用已稀释过【guò】的标【biāo】准品、生物-素标记【jì】抗体工作液或、辣【là】根过【guò】氧化物酶标【biāo】记亲和素工作【zuò】液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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