大鼠 ALCAM ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

中文名称：大鼠 ALCAM ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

产品规格：48T/96

产品存储：低温、避光保存

产品库存：现货供应

产品分类：酶联免疫试剂盒

产品用途：仅供检测，不得用于临床

发货方式：专门快递免费送货上门

实验步骤：

使用【yòng】前将各种【zhǒng】试剂取【qǔ】出【chū】放置30分钟，平【píng】衡【héng】至【zhì】室温，所有【yǒu】标准品和样品【pǐn】必【bì】需【xū】设置平行对照实验，快速加入试剂至样品中，立即漩涡震荡2秒混匀。

1. 依据实验键盘纸决定【dìng】酶标条的使用量【liàng】，将剩余【yú】的酶【méi】标【biāo】条连同干燥【zào】剂一起放回密封塑料【liào】袋，密封【fēng】，4℃保存【cún】。

2. 移取【qǔ】50μL中和液至【zhì】各个微【wēi】孔中，除了TA（全活性）孔和【hé】Blank（空白【bái】）孔。

3. 移取100μL 0.1M HCl至【zhì】NSB(非特异【yì】结合【hé】)孔【kǒng】和B0孔（0 pmol/mL cAMP标准品）。

4. 移取100μL cAMP标准品至相应的孔。

5. 移取100μL样品至相应的孔。

6. 移取50μL 0.1M HCl至NSB（非特【tè】异结【jié】合）孔。

7. 移取50μL 偶联酶至各孔中，除了【le】TA（全活性）孔和Blank（空白【bái】）孔。

8. 移取50μL 抗体工作液至各孔中【zhōng】，除了TA（全活性）孔、Blank（空白）孔【kǒng】和NSB（非特异结合）孔【kǒng】。

9. 将酶标孔置于孔板【bǎn】振动器【qì】上，250~500rpm，室【shì】温孵【fū】育2小【xiǎo】时。

10. 在吸水纸上拍干【gàn】微孔【kǒng】内溶液，加洗【xǐ】涤液400μL每【měi】孔洗3次，每次需拍干。

11. 后一次洗涤，清空各微孔【kǒng】，在干净的【de】无尘吸【xī】水纸上轻【qīng】巧【qiǎo】酶标【biāo】板数次，以确保没【méi】有洗涤液残留【liú】。

12. 加5μL 偶联酶至TA(全活性)孔。

13. 每孔200μL显色底物溶【róng】液，于【yú】室温静【jìng】置5~30分钟。（显色底物【wù】A和【hé】B需在临用前15分钟【zhōng】内等体积【jī】混【hún】合，并避光放置）。

14. 每孔加入50μL终止液，终止后立即读数。

15. 清除酶标仪Blank（空白）孔值，读取450nm处【chù】的光密【mì】度值，在570nm至590nm之【zhī】间好【hǎo】有【yǒu】修正，如【rú】果酶标仪不【bú】能自动【dòng】清除Blank(空【kōng】白)孔值，那么手动扣除每个【gè】读数的Blank（空白）孔光密【mì】度值。

注意事项：

1. 用户在【zài】初次使用【yòng】试剂盒时，应将各种试【shì】剂管离心数【shù】分钟，以便【biàn】试【shì】剂集中到管底。

2. 每【měi】次实验留一孔作为空白调零【líng】孔，该【gāi】孔不【bú】加任【rèn】何试剂，只是zui后【hòu】加底物溶【róng】液【yè】及2N H2SO4，测量时先用此孔调OD值【zhí】至零。

3. 为防【fáng】止样品蒸发，试【shì】验时将反【fǎn】应板放于铺有湿布【bù】的【de】密闭【bì】盒内，酶标板加上【shàng】盖或覆膜。

4. 未使用完【wán】的酶标板或者【zhě】试剂，请【qǐng】于9-21℃保存【cún】，标准【zhǔn】品、生物【wù】-素标记抗【kàng】体工作液【yè】、辣根过氧【yǎng】化物酶标记亲和素工【gōng】作液【yè】请依据所需的量配【pèi】置使用，请勿【wù】重复使用已稀释过的【de】标【biāo】准【zhǔn】品、生【shēng】物-素标记抗体工作液或【huò】、辣根过氧化物酶标【biāo】记亲和素工作【zuò】液。

5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。

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