小鼠 PⅢNP ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

名  称： 小鼠 PⅢNP ELISA试剂盒（酶联免疫检测法）

英　文： PⅢNP ELISA Kit

规  格： 96T/48T

运  输： 快递（生物干冰或冰袋运输）

品  牌： 酶联生物

预【yù】期应用：ELISA法定量测定【dìng】血【xuè】清、血【xuè】浆【jiāng】、细胞培养上清或【huò】其它【tā】相关生物液体中BAP含量

操作注意事项：

1) 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。

2) 稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

3) 实验中【zhōng】不用的板【bǎn】条应立即放回包装袋【dài】中，密封【fēng】保存，以免变【biàn】质【zhì】。

4) 不用的其它试剂应包装好或盖好，不同批号的试剂不要混用。

5) 吸取【qǔ】终止液和底物A、B液时【shí】，避【bì】免使用带【dài】金属部分的加样器。

6) 使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

7) 不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

8) 底物易挥发，避免长时间打开盖子。

9) 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

操作步骤：

1)标准品：标准品【pǐn】的系列稀释应在【zài】实验时准备，不能【néng】储【chǔ】存，稀释【shì】前将标准品振荡混【hún】匀。

2)洗涤缓冲液(50×)的稀释：蒸馏水50倍稀释。

3)使用前，将所有试剂充分混匀，不要使液体产生大量的泡沫。

4)根据待测样品【pǐn】数量加上标【biāo】准品的【de】数量决定所需【xū】的板条数【shù】，每个标准品【pǐn】和空【kōng】白孔建议【yì】做复孔。

5)每个【gè】样品根据自己的数量来定，能使【shǐ】用【yòng】复孔的尽量【liàng】做复【fù】孔，标本用标本【běn】稀【xī】释液1:1稀释后加【jiā】入50ul于反应【yīng】孔内。

6)加入稀释好后【hòu】的标准品50ul于反应【yīng】孔、加入待测【cè】样品【pǐn】50ul于反应孔内【nèi】。

7)盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

8)甩去孔内液体，每孔加满洗【xǐ】涤液【yè】，振荡30秒【miǎo】，甩【shuǎi】去洗涤液，用吸水【shuǐ】纸拍干【gàn】，重复此操【cāo】作3次【cì】。

9)每【měi】孔加入80ul的亲和【hé】链酶素-HRP，轻【qīng】轻振荡混匀，37℃温育【yù】30分【fèn】钟。

10)甩去孔内【nèi】液体，每孔加满洗【xǐ】涤液，振荡30秒，甩去洗【xǐ】涤液，用吸水纸拍干【gàn】。重【chóng】复此操【cāo】作3次。

11)每【měi】孔【kǒng】加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀【yún】，37℃温育10分钟，避【bì】免光照【zhào】。

12)取出【chū】酶标板，迅速加入50ul终止液，加入【rù】终止液【yè】后应立即测定结果【guǒ】。

13)在450nm波长处测定各孔的OD值。

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