小鼠 CollagenIV （酶联免疫检测法）

名  称：  小鼠 CollagenIV（酶联免疫检测法）

英　文： CollagenIV ELISA Kit

规  格： 96T/48T

运  输： 快递（生物干冰或冰袋运输）

品  牌： 酶联生物

预期【qī】应用：ELISA法定量测【cè】定血清、血浆、细胞培养上清【qīng】或其它【tā】相关【guān】生物【wù】液体【tǐ】中BAP含量

操作注意事项：

1) 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。

2) 稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

3) 实验中不用【yòng】的板【bǎn】条应立即【jí】放回包装【zhuāng】袋中，密封保【bǎo】存，以免变质【zhì】。

4) 不用的其它试剂应包装好或盖好，不同批号的试剂不要混用。

5) 吸取终止液和底【dǐ】物【wù】A、B液【yè】时，避免使用带金属部【bù】分的【de】加样器。

6) 使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

7) 不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

8) 底物易挥发，避免长时间打开盖子。

9) 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

操作步骤：

1)标准【zhǔn】品：标准品的系【xì】列【liè】稀释应在实【shí】验时准【zhǔn】备，不能储存，稀【xī】释前将标准品振荡【dàng】混匀。

2)洗涤缓冲液(50×)的稀释：蒸馏水50倍稀释。

3)使用前，将所有试剂充分混匀，不要使液体产生大量的泡沫。

4)根据【jù】待测样【yàng】品数量加上【shàng】标准品的数量决定所需【xū】的板条数，每【měi】个标准品【pǐn】和空白孔【kǒng】建【jiàn】议做复孔。

5)每个样品根据【jù】自【zì】己的数量来定，能【néng】使用复孔的尽【jìn】量做复孔，标本用【yòng】标本稀释液1:1稀【xī】释【shì】后加入50ul于反应孔内【nèi】。

6)加入稀释好后【hòu】的【de】标准【zhǔn】品50ul于反应孔、加【jiā】入待测样品50ul于【yú】反应孔【kǒng】内。

7)盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

8)甩去孔内液体，每孔加满洗涤【dí】液，振荡【dàng】30秒，甩去【qù】洗涤液，用吸水纸【zhǐ】拍干【gàn】，重复此【cǐ】操作【zuò】3次。

9)每【měi】孔【kǒng】加入【rù】80ul的亲和链酶素【sù】-HRP，轻轻振荡【dàng】混【hún】匀，37℃温育30分钟。

10)甩去孔内液体，每孔【kǒng】加满【mǎn】洗【xǐ】涤液，振荡30秒，甩去洗涤液【yè】，用吸【xī】水纸【zhǐ】拍干。重复【fù】此操作3次。

11)每孔加入【rù】底物A、B各50ul，轻轻振荡【dàng】混匀，37℃温育【yù】10分钟【zhōng】，避免光照。

12)取出【chū】酶标板【bǎn】，迅速加入50ul终止液【yè】，加入终止液【yè】后应【yīng】立即测定结果。

13)在450nm波长处测定各孔的OD值。

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