小鼠 ESelectin ELISA试剂盒（酶联检测法）

名  称： 小鼠 ESelectin ELISA试剂盒（酶联检测法）

英　文： ESelectin ELISA Kit

规  格： 96T/48T

运  输： 快递（生物干冰或冰袋运输）

品  牌： 酶联生物

预期应用：ELISA法定量测定血清、血浆、细【xì】胞培养上清或其它【tā】相关生物【wù】液【yè】体【tǐ】中BAP含量

操作注意事项：

1) 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。

2) 稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

3) 实【shí】验中不用的板条应立【lì】即放回包装【zhuāng】袋中【zhōng】，密封保存，以免变【biàn】质。

4) 不用的其它试剂应包装好或盖好，不同批号的试剂不要混用。

5) 吸【xī】取【qǔ】终止液和底物A、B液时，避免使用带金属【shǔ】部分【fèn】的【de】加样器【qì】。

6) 使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

7) 不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

8) 底物易挥发，避免长时间打开盖子。

9) 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

操作步骤：

1)标准【zhǔn】品：标准品的系列稀释应在实验时准备【bèi】，不能【néng】储存，稀释前将标【biāo】准【zhǔn】品振荡混【hún】匀。

2)洗涤缓冲液(50×)的稀释：蒸馏水50倍稀释。

3)使用前，将所有试剂充分混匀，不要使液体产生大量的泡沫。

4)根【gēn】据待测样品【pǐn】数量加【jiā】上标准品的数量决【jué】定所需的板条数【shù】，每个【gè】标准品和空白孔建议【yì】做复孔。

5)每个样品根据自己的数量【liàng】来定，能使用【yòng】复【fù】孔的【de】尽量【liàng】做复孔，标本【běn】用标本稀释液1:1稀释【shì】后加入50ul于【yú】反应【yīng】孔内。

6)加【jiā】入稀释好【hǎo】后的标准品50ul于【yú】反应孔、加入待测样品【pǐn】50ul于反【fǎn】应孔内。

7)盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

8)甩去孔内液体，每孔加满洗涤液【yè】，振荡30秒，甩去洗涤液【yè】，用吸水纸【zhǐ】拍【pāi】干，重复【fù】此操作3次。

9)每【měi】孔【kǒng】加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混【hún】匀【yún】，37℃温育30分钟【zhōng】。

10)甩【shuǎi】去孔内液体，每孔加满洗【xǐ】涤【dí】液，振荡30秒，甩【shuǎi】去洗涤液，用吸水纸【zhǐ】拍干。重复此操作【zuò】3次【cì】。

11)每孔加入底【dǐ】物A、B各50ul，轻轻【qīng】振荡混【hún】匀【yún】，37℃温育10分钟，避免光照。

12)取出酶标板，迅【xùn】速加【jiā】入50ul终止液【yè】，加入终止液后应立即【jí】测定结果。

13)在450nm波长处测定各孔的OD值。

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