应客户们对年前产【chǎn】品预购【gòu】的【de】要求，今日开始逐【zhú】渐安排发货，具体内容公司业务【wù】员会及时联xi。新年的【de】开始【shǐ】中【zhōng】，公【gōng】司技术专员为elisa试剂盒新手入门的使用技术报告做出一番整理，在这里分享给您，供参考。

◎ ELISA方法原理

1. 双抗【kàng】体(原)夹心法：检测抗原(体【tǐ】)的常【cháng】见方法，应用针对抗原两个不【bú】同【tóng】决【jué】定【dìng】族的【de】两种单抗分别作为固相载体和酶【méi】标抗体检测溶液【yè】中的抗原(适用于二价以上抗原，不能测 小【xiǎo】分【fèn】子半抗【kàng】原)。

2. 间接法：检测抗体【tǐ】的方【fāng】法，利【lì】用酶【méi】标记的抗抗体(第【dì】二抗体)检测已与【yǔ】固相抗原结【jié】合【hé】的抗体。

3. 竞争法：检测抗原或小分子半抗【kàng】原、抗【kàng】体，以测抗原为例，使待测抗原和【hé】酶标抗原竞争与固【gù】相【xiàng】抗体结合，结果如待【dài】测抗原含量越多，与固【gù】相【xiàng】抗体结合的酶标【biāo】抗原【yuán】就越少，显色越【yuè】浅，二【èr】者呈负相关。

◎ elisa试剂盒操作注意

① 使【shǐ】用【yòng】干净的塑料【liào】容器配置洗【xǐ】涤液，使用前充分混匀试剂盒【hé】里的各种【zhǒng】成份及样品【pǐn】。

② 洗涤酶标板时应充【chōng】分拍【pāi】干，不要将吸水【shuǐ】纸直接放【fàng】入【rù】酶【méi】标反应孔中吸水。

③ 底物A应挥发，避免长时【shí】间打【dǎ】开盖子【zǐ】。底物【wù】B对光敏感，避免长时【shí】间暴露于光下【xià】。避【bì】免用手【shǒu】接触，有毒。实验完【wán】成后应立即读取OD值【zhí】。

◎ elisa试剂盒质控分析

1. 人员培训内容包括：

①检验项目的基本原理(ELISA试剂盒原理)；

②熟悉检【jiǎn】测技巧，了解易出【chū】差错的环节及难点；熟悉检【jiǎn】测试剂性能(包括试剂【jì】盒组成，包被【bèi】片【piàn】段【duàn】及其组成【chéng】)；③熟【shú】悉检测【cè】仪器的原理及性能;掌握数据处理的能力【lì】和质【zhì】量控制【zhì】知识；

④某些特殊【shū】项目的检测如抗HIV等需经【jīng】有关部门组织的【de】专【zhuān】门【mén】培训班，考试合【hé】格后持证【zhèng】上岗。

2. 基本了解

① 1971年Engvall等人【rén】把免疫组【zǔ】化的EIA技术应用于临【lín】床检验发【fā】展为ELISA试剂盒技【jì】术。

② 特点【diǎn】：ELISA试剂盒【hé】在固相表面【miàn】组装免疫活性物质【zhì】形【xíng】成"免疫吸附剂"。

③ 酶标记免疫活性物质，进行信号放大；

④ 有二步温育反应二次洗涤过程；

⑤ 灵敏度特异性相对较高。

⑥ 局限性：只能检测到ng水平

⑦ 精密度差(批内CV15-20%)；

⑧ ELISA检测试剂盒线性范围窄(一个数量级)；

⑨ 存在"HD-HOOK"效应。