细胞传代：

当【dāng】细胞在细胞培【péi】养瓶内长满【mǎn】达到80%时就要传代，一传二，24小时【shí】后再传代【dài】。48小时传就【jiù】不好了，如【rú】果在24小时后【hòu】细胞【bāo】没有长到【dào】80%，应该换新的培养基【jī】，不然，培养基变黄，细胞【bāo】脱落。

细胞消化：

将【jiāng】细胞培养瓶竖立放【fàng】置【zhì】，吸走培养基，如果培养基【jī】中的脱【tuō】落【luò】细胞较多，说明【míng】细胞【bāo】现在很容易脱落，只要加入1ml的PBS+EDTA(0.02%)，来回轻微【wēi】晃动培【péi】养瓶直到细【xì】胞*脱落，加入10mlMEM(10%杭州四季【jì】青胎【tāi】牛血清)，混匀，不【bú】能吹打，分装2瓶，如果【guǒ】细胞没长【zhǎng】满就脱落，则只需加入5mlMEM，不分装。

如果培养瓶中的细胞贴壁较牢固，培养【yǎng】基上清没有【yǒu】细胞【bāo】脱落碎【suì】片，且细胞长【zhǎng】满【mǎn】达到80%以上，吸走培养基，加入5ml的PBS+EDTA(0.02%)，迅【xùn】速轻微晃【huǎng】动，竖【shù】立培【péi】养瓶，吸走，加入1ml0.05%胰【yí】酶【méi】，37度消化【huà】不超过3min，细胞*消【xiāo】化脱壁，取出加入10ml培养基轻微吸打【dǎ】混匀，分装2瓶。

培养基：

MEM(GIBCO)+10%胎牛血清(杭州四季青)+双抗