1. 一抗选择要点

（1） 确定抗体的名字，注意中英文名字、它名、亚型等信息。

（2） 确定【dìng】你的实验类型，Elisa，WB，IHC，ICC，还是【shì】FACS。一般抗【kàng】体【tǐ】的说明书都会列【liè】出该【gāi】抗体经验【yàn】证【zhèng】过适用于何种实验的类型，如果抗体说明 书没【méi】有提及的应【yīng】用【yòng】类型，并不意味着该抗体【tǐ】不适用于此种分析应用类型，而仅是【shì】说【shuō】明尚【shàng】未经过此种实【shí】验【yàn】验证【zhèng】，请根据说明书列出【chū】的已验证的类型来选择适合你实验的 抗体【tǐ】。

（3） 确【què】定实验样本的种属，Human，Mouse，还是Rat。一【yī】般抗体说【shuō】明书都列出该【gāi】抗体经试验【yàn】验证过适用于何种【zhǒng】物种实验【yàn】，请根据【jù】说明书【shū】列出【chū】已【yǐ】验证的种属来【lái】选【xuǎn】择适合你实验的抗体【tǐ】。

（4） 样本蛋白的结【jié】构性质。了解样本蛋白的结构性【xìng】质【zhì】有助于选【xuǎn】择合适的抗体，待测【cè】样本蛋白的结构【gòu】域和样本【běn】在提取和处理过程【chéng】中是否【fǒu】会变性，蛋白【bái】空间【jiān】构【gòu】象的改【gǎi】变，会【huì】影【yǐng】响抗体的免疫亲和反应。

（5） 单【dān】多克隆抗体的选【xuǎn】择。市面上【shàng】的抗【kàng】体还是以多克隆【lóng】抗体为主，一般【bān】单克隆抗体特异性【xìng】强，但亲和【hé】力相对小，检测抗原灵敏度相对就低；而多克【kè】隆抗体特异性稍【shāo】弱，但抗体的【de】亲和力强，灵敏度高，但易【yì】出现非【fēi】特异性【xìng】染色（可以通过封闭等【děng】避免）。

2. 二抗选择要点

（1）种属来【lái】源。主要根据一【yī】抗种属来源来【lái】决定购买二抗来源，如【rú】一抗是小鼠来源，那二抗就买【mǎi】抗小【xiǎo】鼠的即可（羊、兔等【děng】均可【kě】）。

（2）标记物的选择。有【yǒu】HRP、Biotin、荧光素等标记物【wù】。一般SP三步法二抗选择Biotin标记【jì】的【de】二抗，以【yǐ】与后面的SP结【jié】合【hé】反应，而免疫荧光染【rǎn】色就需要购【gòu】买不同荧光素【sù】标记的二抗，如罗丹明、FITC、Cy3等常用荧光素。