（一）污染清除方法

培【péi】养细胞一经污染，多数【shù】较难处理。如果污【wū】染细胞价【jià】值不大【dà】，宜弃之；在寻找【zhǎo】原【yuán】因【yīn】后*消【xiāo】毒操作室，复苏【sū】或重新购置细胞，再培养。  

污染细胞价值较大，又难于重新得到，可采取以下办法清除。

1. 细菌和真菌的清除

抗生素对杀灭细菌较【jiào】有效。联【lián】合用【yòng】药【yào】比【bǐ】单独用药效果好。预防用药比污【wū】染后再用药效果【guǒ】好。  

预防用药一【yī】般用双抗生素【sù】，污【wū】染后清除【chú】用药【yào】需采用大于常用量5～10倍的冲洗法，于加药后作用24～48小时，再换常【cháng】规培养液。此【cǐ】法在【zài】污染【rǎn】早【zǎo】期【qī】有效。

2. 支原体的清除

(1)  用MRA处理

用MRA（Mycoplasma Removal Agent）处【chù】理【lǐ】细胞，每4天【tiān】换一次液,连续处【chù】理15天以确【què】保细胞纯洁健【jiàn】康，效果好。   

(2)  用清洗纯化法清除支原体污染的方法

细胞【bāo】营养驯【xùn】化→细【xì】胞群的【de】筛选→细胞清洗→反复离心洗涤。

其【qí】原理是利用【yòng】离心力、细胞【bāo】、微生物质量和【hé】悬液的浮【fú】力差达到【dào】清除支原【yuán】体的目的。由于【yú】支原体个体小且【qiě】除发酵【jiào】支原【yuán】体外多为【wéi】细【xì】胞外寄生【shēng】,所以【yǐ】通过反复洗涤细胞和低速离心换液【yè】使其中潜在的支原体数量降低限.

如结合敏感抗生素的抑杀作用，可达到更好的效果。

(3)  药物辅助加温处理

先【xiān】用药物【wù】处理后，再将【jiāng】污染的组【zǔ】织培【péi】养物放在【zài】41℃培养18小时，可杀死支原体，但对细【xì】胞有不【bú】良【liáng】影响。

(4)  使【shǐ】用支原体特【tè】异性血清  

用5%的兔【tù】支【zhī】原体免疫血清可去除支原体污【wū】染【rǎn】，因特异抗体可抑制支原体生长，故经抗血【xuè】清处理后11天即转为【wéi】阴【yīn】性，并且【qiě】5个月【yuè】后仍为【wéi】阴性。

但此法比较麻【má】烦，不【bú】如用抗生【shēng】素方便、经济。   

（二）污染的预防

预防【fáng】是防【fáng】止细胞培【péi】养过程【chéng】中【zhōng】发生污染的办法。只有预防工作【zuò】做在【zài】前，才能将发生污染的可能性降【jiàng】到小程【chéng】度。  

 一般预防可从以下几方面着手：

1、添加抗生素

2、从物品、用品消毒灭菌着手

细【xì】胞培养所用【yòng】物品清洗、消【xiāo】毒要*，各种溶液灭菌除菌要仔细，并在无菌试验阴性后才能【néng】使用。操【cāo】作【zuò】室【shì】及剩【shèng】余的无菌器材【cái】要【yào】定期【qī】清洁消毒灭菌。   

3、从操作者做起

(1)  进无【wú】菌【jun1】室前要用肥皂洗手，按规定穿隔离衣【yī】。工作开始要先用75%酒精【jīng】棉球擦【cā】手、擦瓶口和烧【shāo】灼【zhuó】瓶口。

(2)  操【cāo】作【zuò】者动作要轻【qīng】，必须【xū】在火焰【yàn】周围无【wú】菌区内打【dǎ】开瓶口，并将【jiāng】瓶口【kǒu】转动烧灼。操【cāo】作时尽量不要谈话，若打喷嚏或咳嗽应转向背面。

(3)  操作【zuò】时要常【cháng】更换吸管，一旦发【fā】现吸管口接触了手和其他【tā】污染物品应弃【qì】去。实验完毕用消毒【dú】水浸泡的纱【shā】布擦台面。

4、防止细胞交叉污染

(1)  在进行多种细胞培养操作时，所用器具要严格区分。 

(2)  在进行换液或传代操作【zuò】时【shí】，注【zhù】射器【qì】和滴管不要触及细胞培养瓶瓶口，以【yǐ】免把细【xì】胞【bāo】带到培养液中污染其他【tā】细胞。   '

(3)  细胞一【yī】旦购置或从别【bié】处引入，均【jun1】应及早留种【zhǒng】冻存，一旦发生污染【rǎn】可重新复苏培【péi】养。

5、无菌室的*消毒 

(1)  0.1%新洁尔灭全面*擦洗无菌室；

(2)  甲醛熏蒸法：甲醛是一【yī】种广谱【pǔ】灭菌剂菌，其【qí】水溶【róng】液和气休对各种细菌【jun1】、芽孢及真菌等微生物均有【yǒu】杀灭【miè】作用【yòng】。

(3)  细胞培养，首先要避免污染，但【dàn】在【zài】细胞培【péi】养过程【chéng】中，有【yǒu】了污【wū】染用适当的方法【fǎ】清除，这样也可以保证细胞培【péi】养【yǎng】的成功。