ELISA是酶联接免疫吸附【fù】剂测【cè】定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的简称。它【tā】是【shì】继免疫荧光和放射免【miǎn】疫技术【shù】之后发展起来的一种【zhǒng】免【miǎn】疫酶技术【shù】。此项技术自70年代初问【wèn】世以来，发【fā】展十分迅速，目前已被广【guǎng】泛用【yòng】于生物学和医学科学的许多领域。ELISA免疫【yì】测定,您真【zhēn】的【de】掌握透彻了吗【ma】?不要【yào】着急【jí】，接着往下【xià】看！

ELISA免疫测定目的是？
1.测定【dìng】体【tǐ】液中的各种蛋白质，包括含量极少的蛋【dàn】白质如甲【jiǎ】胎蛋白【bái】等；
2.测定激素，包括小分子量的甾体激素等；
3.测定抗生素和药物；
4.测定病原体抗原，HBsAg、HBeAg等；
5.利用纯化的抗原检测标本中的抗体，例如抗-HBs等；

ELISA免疫测定原理：
①使抗原（或抗体）结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性；
②使抗原【yuán】（或【huò】抗体）与某种酶联结成酶标 抗【kàng】原（或抗体），而【ér】且此【cǐ】酶标【biāo】抗原【yuán】（或抗体【tǐ】）既保留其免疫活性，又保留其【qí】酶活性；
③测定时将受检标本（抗体或抗原【yuán】）和酶标抗原【yuán】（或 抗【kàng】体）按不【bú】同步骤【zhòu】与【yǔ】固相载【zǎi】体【tǐ】表面的抗【kàng】原或抗体进行反应，再用洗涤方法使固相载【zǎi】体上形成的抗【kàng】原【yuán】抗体【tǐ】复合【hé】物【wù】与其它物【wù】质分开，zui后结合 在【zài】固相【xiàng】载体上【shàng】的酶量与标本中受检的【de】抗体【tǐ】或抗【kàng】原量成一定比例；再加入【rù】酶反应底物【wù】后，底物被酶催【cuī】化后变为【wéi】有色【sè】产物，根据其颜色反【fǎn】应的 深浅进行定性或定量分析，以了解【jiě】被测标本中【zhōng】抗体或抗原含【hán】量。

ELISA免疫测定步骤：
1.包被；
2.加【jiā】样：加一定稀释【shì】的待检样品0.1ml于上述【shù】已包被之反应孔中，置37℃孵【fū】育1小时。然后洗涤(同时做空白【bái】孔，阴【yīn】性对【duì】照孔及阳性对照【zhào】孔)；
3.加酶标抗体：于各反应孔中【zhōng】，加入【rù】新鲜【xiān】稀【xī】释【shì】的【de】酶标抗体(经滴定后【hòu】的稀【xī】释度)0.1ml。37℃孵育0.5～1小时，洗涤。
4.加底物液显色：于【yú】各反应孔中加入【rù】临时配制【zhì】的【de】TMB底物溶液【yè】0.1ml，37℃10～30分钟；
5.终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml；
6.结果判定：可于【yú】白色背景上，直【zhí】接【jiē】用【yòng】肉眼观察【chá】结果【guǒ】：反应孔内颜【yán】色越深，阳【yáng】性程度越强，阴性反应【yīng】为无色或极浅。也可【kě】测OD值：在ELISA检测仪【yí】上，于450nm处，以空白【bái】对照孔调【diào】零后测各孔OD值。

    注意：引起【qǐ】ELISA测定错误结果的原【yuán】因有标本因素、试剂因【yīn】素【sù】、操作因素。如果【guǒ】您在【zài】操作【zuò】中遇到任何不明白的，不【bú】妨【fáng】来电详询本公【gōng】司业【yè】务员，我们将为您免【miǎn】费安排技术【shù】指导【dǎo】服务（代测、培训、委托加工、定制等）。上海【hǎi】恒远生物【wù】将与【yǔ】广大工作【zuò】者一起交【jiāo】流问【wèn】题【tí】，共同提高，让【ràng】您成为真正的能手。