大鼠胰岛细胞瘤细胞（INS-1）

大鼠胰岛细胞瘤细胞(INS-1)
细胞介绍
该细胞源【yuán】自X射线照【zhào】射的移植【zhí】胰岛【dǎo】瘤的大鼠，胰岛素阳性，可合成胰岛素原【yuán】I和【hé】II，可用于beta细胞功【gōng】能研究。
 
细胞特性
1)来源：大鼠移植胰岛瘤
2)形态：贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
运输和【hé】保存：使用含有胎牛血清【qīng】的2ml冻存管【guǎn】发送存活细胞【bāo】。收到【dào】细【xì】胞后，可在【zài】1000RPM，常温条【tiáo】件下，离心5min后，于洁【jié】净操作台弃【qì】去上清，加【jiā】入推荐使用的培养基【jī】后转移至l〇cm培养皿或者T25培养瓶中培养，传代达到细胞生长【zhǎng】状【zhuàng】态良【liáng】好【hǎo】时，再进行冻存。具体操【cāo】作见细【xì】胞培养步骤。
 
大鼠胰岛细胞瘤细胞(INS-1)细胞用途：仅供使用。
细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准【zhǔn】备【bèi】 RPIVM-1640 培养基(RPMI-1640:GIBCO)，90%;胎牛血清，10%，添【tiān】加50|amol/L(3 —疏基乙醇。
2.培养条件【jiàn】：气相：空气，95%;二氧化碳【tàn】，5%。温度：37摄【shè】氏【shì】度，培养箱【xiāng】湿度为70%-80%。
3.冻存【cún】液：90%*培养基，10%DMSO,现【xiàn】用现【xiàn】配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏【sū】细【xì】胞：将【jiāng】含有lmL细胞悬【xuán】液的冻存管在37°C水【shuǐ】浴中迅速【sù】摇晃解冻，加【jiā】入4mL培养基混合均匀。在【zài】1000RPM条件下离心4分钟，弃去上【shàng】清液，补【bǔ】加【jiā】l-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过【guò】夜（或【huò】将【jiāng】细胞悬液加入l〇cm皿【mǐn】中，加入约【yuē】8ml培养基【jī】，培养过【guò】夜）。第二天换液并检查细【xì】胞密度【dù】。细【xì】胞传代【dài】：如果细胞密度达【dá】80%-90%，即可进【jìn】行传【chuán】代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养【yǎng】上清，用不含钙、镁离子【zǐ】的PBS润洗细胞9-21次。力口 2m丨消【xiāo】化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中，置【zhì】于【yú】37°C培养箱中消化9-21分【fèn】钟，然【rán】后【hòu】在显微镜下观【guān】察细胞【bāo】消化情况，若细胞大部分变【biàn】圆【yuán】并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下【xià】培养瓶后加少量培养基终止【zhǐ】消化【huà】。
按【àn】6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下【xià】离心4分钟，弃去上清液，补加l-2mL培养液后吹匀。将细胞悬【xuán】液按1: 2到1: 5的【de】比例分到【dào】新的含8ml培【péi】养基的新皿【mǐn】中或者瓶中。
细胞冻存：待细胞生长状态良【liáng】好时，可进行【háng】细胞冻存。贴壁【bì】细胞冻存时【shí】，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变【biàn】圆脱【tuō】落【luò】后，加【jiā】入约【yuē】lml含【hán】血清的培【péi】养基后【hòu】加入【rù】冻存管中【zhōng】，再添加1〇%DMSO后【hòu】进行冻存。
 
大鼠胰岛细胞瘤细胞(INS-1)注意事项：
收到【dào】细【xì】胞后，若发现干【gàn】冰己挥发干净【jìng】、冻存【cún】管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们电联【lián】。
所有动物细胞【bāo】均视为【wéi】有潜【qián】在的生物【wù】危害【hài】性，必须在二级生【shēng】物安全台【tái】内操【cāo】作，并请注意防护【hù】，所有废【fèi】液及【jí】接触过此细胞的器皿需要灭菌后【hòu】方能丢弃。