在ELISA实验中我【wǒ】们经【jīng】常会【huì】碰到试【shì】剂【jì】盒变质的问题，是什么原因导致【zhì】了ELISA试剂盒的变质呢？接下来我【wǒ】就和大家说一说导致ELISA试剂盒【hé】变质的【de】原【yuán】因有哪些【xiē】。

导致ELISA试剂盒变质的原因主要分为七种：

1、方法学的影响

ELISA测定模式包括以【yǐ】下几种：双抗体夹心法、间接法、双抗原夹心法、IgM抗体捕捉【zhuō】法、竞争抑【yì】制法，其【qí】中竞【jìng】争【zhēng】抑制【zhì】法(HBeAb,HBcAb等【děng】采【cǎi】用【yòng】)因受操作时差所引起的bu公平竞【jìng】争等因素【sù】的影响，结果重【chóng】复性较【jiào】差【chà】，质【zhì】量较难控【kòng】制。

2、试剂因素

不同批次的ELISA试【shì】剂在制作过【guò】程中很【hěn】难保证质量一致，即使是通过批检的项目其检测结果也会存在差【chà】异【yì】，因此必须选择和订购长批号的试剂，并【bìng】保【bǎo】证保存条【tiáo】件。 严【yán】格【gé】执行这【zhè】一标准可以【yǐ】避免因试剂批号改变而重新建立质控体【tǐ】系及【jí】重新评估试剂的复杂【zá】过程，并且【qiě】能够保证结果【guǒ】的稳定性；对【duì】于【yú】效【xiào】期【qī】短、使用率【lǜ】低的试剂，应【yīng】当【dāng】小量分装，每次使用则【zé】取分装部分【fèn】即可，避免【miǎn】反复【fù】冻融造成试【shì】剂的失效。

3、样本因素

标【biāo】本干扰因素包括内源性干【gàn】扰因素和【hé】外源性干扰因素，前者包括类风湿因子、补【bǔ】体、异嗜性抗体【tǐ】、自身抗体、等，后者包括标本溶血、标【biāo】本被【bèi】细【xì】菌污染、标本贮存时间过长、标本【běn】凝固【gù】不全、冷冻【dòng】标【biāo】本的反【fǎn】复冻【dòng】融【róng】等【děng】。

4、操作因素

 ELISA操作步骤复杂，操作【zuò】不【bú】当【dāng】将引起较大的【de】误差。加样、温【wēn】育、洗涤、显色、比色。

5、标本复查

ELISA手工【gōng】检测【cè】过【guò】程复杂【zá】，影响因素较多，即使室内质控在控，也可能因孔【kǒng】间差异而造成结果的差异，因此【cǐ】加大复【fù】查【chá】力【lì】度是保证【zhèng】结果准确性的可靠【kào】方法【fǎ】。

6、表示结果的常用方法

①定性测定。

②半定量测定，结果一般以滴度表示。

③定量测定，即【jí】用已知量的【de】标准品作一系列稀释后【hòu】进【jìn】行ELISA测定，绘制【zhì】标准曲线【xiàn】，结【jié】果【guǒ】以量或【huò】单位表示。在ELISA定【dìng】量【liàng】检测中每一块反应板都必须绘制相应的标【biāo】准曲【qǔ】线。