动物细胞培养的必需条件：

在所有【yǒu】的细胞【bāo】离体培养中，最【zuì】困难的是动【dòng】物细胞培养。下面是它所【suǒ】需要【yào】的特殊【shū】条件。

⑴血清：动物细【xì】胞【bāo】离体培养常常需要【yào】血清。常【cháng】用【yòng】的是小牛血清。血清提供生【shēng】长必需因子，如激【jī】素、微量元素、矿物质【zhì】和脂肪。在这里【lǐ】，血清【qīng】等于是动物细胞【bāo】离体培养【yǎng】的天然【rán】营养液。

⑵支持【chí】物：大多数动物细胞【bāo】有贴壁生【shēng】长的【de】习惯。离体培养【yǎng】常用玻璃，塑【sù】料等作为支持【chí】物。

⑶气体【tǐ】交换【huàn】：二氧化碳和氧气【qì】的比例要在细胞培养过【guò】程中不【bú】断进行调节，不断维【wéi】持所【suǒ】需要的气体条件【jiàn】。

动物细胞培养的培养步骤：

注：所【suǒ】有【yǒu】步骤应在无菌无毒的超净工【gōng】作台进行。蛋白酶【méi】处理时【shí】间不【bú】宜过长。

取离体【tǐ】的动物组【zǔ】织【zhī】，器官或细【xì】胞【bāo】，剪碎并【bìng】加入yi蛋白【bái】酶分解成单个细胞，配置形成细胞悬液。

制备动物细【xì】胞培【péi】养液体培养【yǎng】基（需加入血【xuè】清，保证无【wú】菌无【wú】毒），将【jiāng】细胞【bāo】接种至培养基，放入二【èr】氧化碳培养【yǎng】箱中进行初代培养。

当细胞增殖达到一定程【chéng】度【dù】，出现接触抑【yì】制现象时【shí】，用yi蛋【dàn】白酶再次【cì】处理，并用细胞悬液【yè】吹打贴壁生长【zhǎng】的细胞。进行细胞【bāo】计数。

依照计数结果，分瓶培养，进行传代培养。获得细胞系或细胞株。