成功的实【shí】验是个循序渐进的过程影响EL ISA实验结果的因素有很【hěn】多只有的【de】掌握【wò】了实【shí】验的【de】细节才能购做出好的【de】实验。 您可【kě】知您的【de】ELISA试剂盒实验为什么会失败?下面酶联生物带大家了解一下。

一、标本的影响

溶血标本及混有红细【xì】胞的血【xuè】清采用【yòng】E1 ISA法检测易产生假【jiǎ】阳性。可能是溶血血清中含有过【guò】氧化【huà】酶物质(红细胞或血红蛋白中的亚铁血【xuè】红【hóng】素【sù】)在洗涤过程中往往难以洗脱【tuō】它【tā】可【kě】使H202释【shì】放出原生态氧 (0)从【cóng】而催化底物四甲【jiǎ】基联【lián】苯胺可溶性的【de】有色物质即显【xiǎn】蓝色产【chǎn】生假阳性。所以严重溶【róng】血【xuè】标本禁用。

二、标本受细菌污染

因【yīn】菌体中可能含有内【nèi】源性辣根过【guò】氧化【huà】物酶【méi】因此【cǐ】 被细菌污【wū】染的标本同溶血标本样 亦可产生【shēng】非【fēi】特异【yì】性显色而干扰测定结果。

三、标本保存不挡

在冰箱中保存过久的标本在【zài】间接法ELISA测定中会导【dǎo】致本底【dǐ】过深【shēn】 造【zào】成假阳性【xìng】;为克服【fú】 上述干扰ELISA试剂盒【hé】测定【dìng】的【de】血清标本宜为新鲜采集;如【rú】不能立【lì】即【jí】测定5d内测定的血清标本可存放于4°C,1周后测定的血清标本【běn】应【yīng】低温冻存 ;冻存后融【róng】解的【de】标【biāo】本 蛋白【bái】质局部【bù】浓缩分【fèn】布不均 应充分混合后再测定【dìng】但混匀【yún】时应轻柔不【bú】可强烈振荡。

四、标本凝固不全

在工【gōng】作中有时为了争取时间快速检测 常在血【xuè】液还未开【kāi】始【shǐ】凝【níng】固时即【jí】强行离心分离血【xuè】清使血清中仍残留部分纤【xiān】维【wéi】蛋白原 在EL ISA测定过程中可以形成肉眼可见的【de】纤维【wéi】蛋白块易造成假阳性结【jié】果【guǒ】 ;因此血波【bō】标本【běn】采集后必须使其充分【fèn】凝固后再【zài】分离【lí】血清【qīng】。

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以上是酶联生物带您了解ELISA试剂盒实验失败的原因，您知道了吗？