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介绍ELISA试剂盒变质的原因有哪些
更【gèng】新时间:2024-9-22   点击【jī】次数:636次【cì】

ELISA试剂盒的好坏会直接影响ELISA实验的结果,有的时【shí】候ELISA试【shì】剂【jì】盒【hé】会出现【xiàn】变质的【de】情【qíng】况,那么,是什么【me】原因造成ELISA试剂盒变质呢?今天我【wǒ】们就来介绍一【yī】下【xià】ELISA试【shì】剂盒变【biàn】质的原因。 


1、方法学的影响   

ELISA测【cè】定模式包括以下【xià】几种【zhǒng】:双抗体夹心法、间接法、双抗原夹心法、IgM抗体捕捉法、竞【jìng】争抑制法,其中竞争抑制法(HBeAb,HBcAb等采用【yòng】)因【yīn】受操【cāo】作时差【chà】所【suǒ】引【yǐn】起的竞争等因【yīn】素的影响,结果重【chóng】复性较【jiào】差,质【zhì】量较难控【kòng】制。所以说,各种【zhǒng】实验方法在操作【zuò】过程中可能【néng】会【huì】导致ELISA试剂盒【hé】变质。 


2、试剂因素 

不同批次的ELISA试剂在制作过程中很难保证质量一致,即使是通过批批检验的项目其检测【cè】结果也存【cún】在差异,因【yīn】此必须【xū】选择和订【dìng】购长批号的试剂【jì】,并保证保【bǎo】存条件。严格【gé】执行这一标准可以避免【miǎn】因试剂批号【hào】改变而重新【xīn】建立质【zhì】控体系及重【chóng】新评估试剂的复杂【zá】过程,并且能【néng】够保【bǎo】证结果【guǒ】的【de】稳【wěn】定【dìng】性。对于【yú】效期短、使用率低的试剂,应当小量分装,每【měi】次【cì】使用则【zé】取分装部分【fèn】即可,避免反复冻融造成试剂的失效【xiào】。 


3、样本因素 

标本【běn】干扰【rǎo】因素包括内源性干【gàn】扰因素和外源性干扰因【yīn】素,前者【zhě】包括类风【fēng】湿因子、补【bǔ】体、异嗜性抗体、自身抗体、等,后者【zhě】包括标本溶血、标本被【bèi】细菌【jun1】污染、标【biāo】本贮【zhù】存时间过长、标本凝固【gù】不全、冷冻【dòng】标本的反复冻融【róng】等。 


4、操作因素 

ELISA操作步骤复杂,操作不【bú】当将引起【qǐ】较大的误差。加【jiā】样、温育、洗涤、显【xiǎn】色、比色。这些步骤【zhòu】在操【cāo】作【zuò】过程中,操【cāo】作不当【dāng】或者【zhě】操作时间【jiān】过长【zhǎng】都有可能【néng】造成ELISA试剂盒的变质。 


5、常表示结果的常用方法

⑴.定性测定。

⑵.半定量测定 结果一般以滴度表示。

⑶.定量测定 即【jí】用已【yǐ】知量【liàng】的标【biāo】准品作一系列稀【xī】释后进行ELISA测定,绘制标【biāo】准曲线,结果以量或单【dān】位表【biǎo】示。在ELISA定【dìng】量检测中每一块【kuài】反应【yīng】板都必须绘制相应的标准曲线。


ELISA实验过程【chéng】复杂,影响因素较【jiào】多,而ELISA试剂盒的有效性是ELISA实【shí】验能【néng】够顺利进【jìn】行的前提,因【yīn】此【cǐ】在实验【yàn】过程中要细心操作【zuò】,安全保存各种【zhǒng】试剂,加大【dà】复【fù】查力度,确保实验【yàn】结果的【de】准【zhǔn】确。 


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以上是介绍ELISA试剂盒变质的原因有哪些?

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