Elisa试剂盒采用【yòng】双抗【kàng】体一步夹心法酶联免疫【yì】吸附试验。计算方法是以标准物【wù】的浓度【dù】为横坐【zuò】标，OD值为纵【zòng】坐标，在半对数坐标纸上绘出标准曲线，根【gēn】据样【yàng】品的OD值【zhí】由标【biāo】准曲线查出相应的浓【nóng】度；再乘以稀释【shì】倍数；或用标准物的浓度与【yǔ】OD值计算出【chū】标【biāo】准曲线【xiàn】的直线回归方程【chéng】式，将【jiāng】样品的【de】OD值代入方程式，计算出样【yàng】品浓【nóng】度，再乘以稀释倍数【shù】，即为样品的实【shí】际浓度。

Elisa试剂盒在没有去离【lí】子水或【huò】双蒸水时，可以使用纯净水配【pèi】制溶【róng】液【yè】，切勿【wù】使【shǐ】用自来水。

1.样品稀释【shì】：酶联免疫反应是一种敏感性很高的反应，如果血清【qīng】不稀释，不【bú】可避免会产生很强的非【fēi】特异性反应，出现【xiàn】假阳性【xìng】。因此，国外【wài】检测血清【qīng】抗体的【de】试剂盒，均规定将血清稀释至适【shì】当的倍数【shù】，以降【jiàng】低非【fēi】特异性反应，使特异性的【de】抗原抗体反应充分【fèn】体【tǐ】现出来【lái】。样品稀释倍数均通过大量试验确定，以保【bǎo】证试验的灵敏度和特异性。但【dàn】是，有些用户未能严格按使用说明书操作，如【rú】产品应【yīng】取10u1样品进行【háng】稀【xī】释，个【gè】别用户取5u1甚至1u1样【yàng】品进【jìn】行稀【xī】释，由于吸嘴上不可避免地【dì】沾【zhān】有样品以及微量移液器的精【jīng】度不【bú】够，因此【cǐ】造成样品【pǐn】稀释【shì】倍【bèi】数不准确，检测结果出【chū】现问【wèn】题【tí】。

2.试剂盒平衡【héng】：试剂盒中所有试【shì】剂和板条均应【yīng】在试验【yàn】前平衡【héng】至室温(约25℃)，一般需在室温放置20~30分钟【zhōng】以【yǐ】上。平衡时间太短会造成试【shì】剂混匀不【bú】够，样品孵育时间相对缩【suō】短【duǎn】，ELISA反【fǎn】应不【bú】够充分。冬季室温低，可将【jiāng】试剂【jì】盒打开盒【hé】盖【gài】置37℃温箱20分钟。稀释前【qián】、后的样品需要充分混匀，所【suǒ】有【yǒu】试剂在加样前也【yě】须摇匀【yún】，以保【bǎo】证试验的均一性。

3.加样【yàng】：尽量操作规范，将液体垂直悬空快速【sù】加入到微【wēi】孔板中【zhōng】，避免加到孔避【bì】上。加完试剂后用【yòng】手适当【dāng】振【zhèn】荡或在桌面适当作【zuò】圆【yuán】周运动，使孔内试【shì】剂充分混匀，盖好【hǎo】盖【gài】板膜。

4.洗板：洗液尽【jìn】量不要溢出孔外；加【jiā】洗液后要【yào】静置【zhì】10-15s，甩【shuǎi】去板孔中洗液后【hòu】，一定【dìng】要用力拍干；及时更换吸水纸【zhǐ】，尤其是【shì】拍过【guò】酶标记物的吸水纸一定要弃去，否则【zé】可能影响试【shì】验结果。

上海酶联生物科技有限公司专业经营生物科学领域的实验仪器、研究试剂和实【shí】验【yàn】室耗材，致力【lì】于向国内外生物【wù】科【kē】学研究人员【yuán】提【tí】供服务。专【zhuān】业生产厂家【jiā】具有【yǒu】先【xiān】进水平的产品【pǐn】推荐【jiàn】给各类研究人员；另一【yī】方面也非常重视自【zì】主产品研究和【hé】开发，推出了【le】一系列具有竞争【zhēng】力的【de】产【chǎn】品和服务【wù】。同时【shí】国家对于生物行业的发【fā】展给予【yǔ】了极大的重视，更【gèng】多地侧重【chóng】于的【de】投入。

以上是Elisa试剂盒样品进行如何正确稀释你知道吗？