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上海酶联浅谈如何区分双抗夹心法、间接法和竞争法
更新【xīn】时【shí】间:2024-9-22   点击次数:1896次

近年来【lái】,ELISA试剂盒【hé】以【yǐ】灵【líng】敏度较【jiào】高、特异性较好的特点得到了广泛的应【yīng】用,ELISA试剂【jì】盒根据试剂的来源和标本【běn】的情况以及检测的具【jù】体条件,又分为双抗夹心法【fǎ】、间接法、竞争法等几种类【lèi】型【xíng】。


那么,这【zhè】几种类【lèi】型【xíng】分【fèn】别应用于哪些实验?这些类型的优缺点又是什么【me】呢?请继续往【wǎng】下看!

双抗体夹心法测抗原:双抗体夹心法是检测抗原常用的方法【fǎ】,适用于测定二价或二价以上的【de】大分子抗原,但不【bú】适用于测定半【bàn】抗【kàng】原及【jí】小分子【zǐ】单价抗【kàng】原,因其【qí】不能形成两位点【diǎn】夹心。


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双【shuāng】抗原夹【jiá】心【xīn】法【fǎ】测【cè】抗体:反应【yīng】模式【shì】与双【shuāng】抗体夹心【xīn】法类似。用特异【yì】性抗原进行包被和【hé】制备酶结合物【wù】,以检测相【xiàng】应的【de】抗体。与间接法测【cè】抗体的不同之处为以酶标【biāo】抗原代替酶标【biāo】抗【kàng】抗体。此法中【zhōng】受检标本不需稀释,可直接用于【yú】测定,因此其敏感度相对高于间接【jiē】法【fǎ】。乙肝【gān】标志物中抗HBs的检测常采用本法。本法关键在【zài】于酶标抗【kàng】原的制备,应根据抗原【yuán】结构的不【bú】同,寻找合适的标记方法。


间接法:是检测抗体常用的方【fāng】法【fǎ】,本法主要用【yòng】于对病原体抗体的【de】检【jiǎn】测而进行【háng】传染病的诊断。 

竞【jìng】争【zhēng】法测抗体:当抗【kàng】原材料中的【de】干扰物质不易除去,或不易得到【dào】足够的【de】纯化抗原时【shí】,可用此法检测特异性抗体。其原【yuán】理为标【biāo】本中的【de】抗体和一定量的【de】酶标抗体竞争与固相抗【kàng】原结【jié】合。抗HBe的检测一【yī】般采用此法。 


竞争法测抗【kàng】原:小分【fèn】子抗原或半抗原因缺乏可作夹【jiá】心法的【de】两个以上的位点,因此【cǐ】不能【néng】用双抗【kàng】体夹心法进行测定【dìng】,可【kě】以采用竞【jìng】争法模式。其原理【lǐ】是标本中的抗原和一定量的酶标抗原竞争与固相抗体结【jié】合。标本中【zhōng】抗【kàng】原量含量愈多【duō】,结合【hé】在固相上的【de】酶【méi】标【biāo】抗【kàng】原愈少,后的【de】显色也愈【yù】浅。小分子激素【sù】、药【yào】物等ELISA测定【dìng】多用此法。


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