在ELISA实验中，血清是极为常见【jiàn】的样本，那【nà】么【me】在【zài】ELISA实验过程中处理【lǐ】血清【qīng】样本时有【yǒu】哪些注意事【shì】项呢？今天就跟大家【jiā】来介绍【shào】一下。

   1、要注意避【bì】免出现严重溶血。血红【hóng】蛋白中含有血【xuè】红素【sù】基【jī】团，其有类似过氧化物的活性，因【yīn】此，在以HRP为标记酶的ELISA测【cè】定中，如血清样本【běn】中血【xuè】红蛋白浓度较【jiào】高，则其就很容易在温【wēn】育过程【chéng】中吸附于固【gù】相，从而【ér】与后面加入的HRP底物反应【yīng】显色。

   2、样本【běn】的采集及血清分离中要注意【yì】尽量避【bì】免细菌【jun1】污染，一则细【xì】菌的生长【zhǎng】，其所分泌的一些酶可能会对抗【kàng】原【yuán】抗【kàng】体等蛋【dàn】白产生分解作用；二则一些细菌的【de】内【nèi】源性酶如大肠杆菌的β-半乳糖苷【gān】酶本身会对用相【xiàng】应酶作【zuò】标记的测定方法产【chǎn】生非特【tè】异性【xìng】干扰。

   3、血清【qīng】样本如是以无菌操作分离，则可以在【zài】2～8℃下【xià】保存一周，如为有菌【jun1】操作，则建【jiàn】议冰冻保存【cún】。样本的长时【shí】间保存，应在-70℃以下。

   4、冰冻【dòng】保【bǎo】存【cún】的血清样本须注意避免因停电等造【zào】成的反复冻融。样本的反复冻融所产生的机【jī】械剪【jiǎn】切【qiē】力将对标本中的蛋白等分子产生破坏作用，从【cóng】而引【yǐn】起假【jiǎ】阴性结果。此外【wài】，冻【dòng】融样本的【de】混匀亦应注【zhù】意，不要进行剧烈振荡，反【fǎn】复颠倒混匀即可。

   5、样本在保存中【zhōng】如【rú】出现细菌污染所【suǒ】致的混浊或絮状物【wù】时，应离心沉【chén】淀后【hòu】取上清检测【cè】。

   以上【shàng】就是ELISA实验中处【chù】理血清【qīng】样本【běn】的注意事项，处理好【hǎo】实验样本是能顺利进【jìn】行【háng】实验【yàn】的前提，所以大家在【zài】一定要多加注意。

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