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处理羊ELISA试剂盒需要注意什么
更新时间【jiān】:2024-9-22   点【diǎn】击次数:1323次【cì】
  处理羊ELISA试剂盒我们首先需要在实验【yàn】前1小时将羊ELISA试剂【jì】盒从【cóng】冰箱【xiāng】中取出,使各种【zhǒng】试【shì】剂都恢复到室【shì】温,以使结果更稳定。实验时,要使【shǐ】底物避光保【bǎo】存,用【yòng】枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡【pào】而使吸取量不【bú】准【zhǔn】确【què】,吸取液【yè】体时,要用量程和【hé】需要量接近的枪去吸,减少【shǎo】误差,要【yào】保证移液【yè】枪的准确性,误差不能【néng】超过【guò】百【bǎi】分之2。
 
  1、血清:室温血液自然【rán】凝固9-22分【fèn】钟,离心20分钟【zhōng】左右(2000-3000转/分)。仔【zǎi】细收集上清,保存【cún】过程中如【rú】出现沉淀,应再次【cì】离心。
 
  2、血浆【jiāng】:应根【gēn】据羊【yáng】ELISA试剂盒的标【biāo】本的要求选择【zé】EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合9-22分钟后【hòu】,离心20分钟左【zuǒ】右(2000-3000转/分),保存过程中如有沉淀形成【chéng】,应【yīng】该【gāi】再次离心【xīn】。
 
ELISA实验
  3、尿【niào】液:用无菌【jun1】管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分【fèn】)。仔细收集【jí】上清,保存过程中【zhōng】如【rú】有沉淀形成,应再【zài】次离心。
 
  4、细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用【yòng】无菌管【guǎn】收集【jí】。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔【zǎi】细收集上【shàng】清【qīng】。检【jiǎn】测【cè】细胞内的成份时,用PBS(PH7.9-22.4)稀释细胞【bāo】悬液【yè】,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻【dòng】融,以【yǐ】使细【xì】胞破坏并放出【chū】细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保【bǎo】存过【guò】程中如有沉淀形成,应再【zài】次离【lí】心。
 
  5、组织标本:切割标本【běn】后,称【chēng】取重量。加入一定量【liàng】的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存【cún】备用【yòng】。标【biāo】本融化后仍然保持【chí】9-22℃的温度【dù】。加入【rù】一定【dìng】量的PBS,用手【shǒu】工或匀浆器将标本匀【yún】浆充分。离心20分钟左【zuǒ】右(2000-3000转/分)。仔细收【shōu】集上清。分装后一【yī】份待检测,其余冷冻备用。
 
  6、标【biāo】本采集后尽早【zǎo】进行提取,提取按相关【guān】文【wén】献【xiàn】进行,提取后应尽快进行【háng】实验。若【ruò】不能马上进行【háng】ELISA试剂盒试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
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