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影响ELISA试剂盒实验的因素有哪些
更新时【shí】间:2024-9-22   点击次【cì】数【shù】:1077次
  ELISA试剂盒又被【bèi】称为即酶联免【miǎn】疫【yì】法。上【shàng】海酶联生物ELISA法具有灵敏【mǐn】度【dù】高、特异性强、重复性【xìng】好的特点,并具有操作简洁、无放射性【xìng】危害的优点,因【yīn】此多年来广泛应【yīng】用于【yú】各高校、学院和【hé】机【jī】构的试【shì】验室中。
 
  上海酶联生物【wù】通过几年的试验调【diào】查,得出结论影【yǐng】响ELISA试验【yàn】的要素【sù】有如下【xià】三方面:
 
  一、试剂盒
 
  1、抗原、抗体活性对效【xiào】价的【de】影响:主要是试【shì】剂中抗体(或抗原)的效价【jià】下降或失活【huó】,成果不易判别。再有【yǒu】ELISA试【shì】剂【jì】盒灵敏度【dù】高,对杂质的反响灵敏【mǐn】度也高,试验中空白对照OD值偏高【gāo】或假阳性【xìng】;
 
  2、酶结合物浓度过高,也会导致OD值假性增高。
 
ELISA实验
       二、试【shì】验仪器
 
  1、加样器是【shì】否通过【guò】校正,酶免测定血清用血【xuè】量【liàng】很少【shǎo】,如手【shǒu】工【gōng】加样器的功能不好,吸取样品不,会使成【chéng】果忽高忽【hū】低;
 
  2、每次洗板前,应查看洗板机针孔有无阻塞。
 
  三、ELISA试剂盒操作
 
  1、检测前【qián】先将试剂盒【hé】从冰箱【xiāng】取出【chū】置室温平衡20min后【hòu】运【yùn】用,试【shì】剂用完及时放回冰箱冷藏,避免形成试验成果【guǒ】假性下降【jiàng】;
 
  2、加样时【shí】留意勿触及包【bāo】被板底部,避免擦【cā】伤包被【bèi】物使抗体【tǐ】(抗【kàng】原)掉落而影响试验【yàn】成果【guǒ】的精确性;
 
  3、洗刷不充分,会使成果假性增高,过分洗刷呈假阴性;
 
  4、比色时【shí】应保【bǎo】持包被孔底部无异物、无水汽,特【tè】别【bié】是冬天板从【cóng】37℃水【shuǐ】浴箱取出时,底部留有水汽,应【yīng】将板底【dǐ】擦干后进行比色,水【shuǐ】汽或孔内气泡也【yě】会使OD值升高;
 
  5、抗原与抗体反响【xiǎng】达到*平【píng】衡,依赖于温度与时刻。温度高于【yú】45℃易【yì】引起失活及【jí】符号物掉落,温度【dù】低于【yú】4℃,影响反【fǎn】响【xiǎng】速度。
 
  由于ELISA试剂盒试验的影响要素较多,我们在实践工作中必【bì】须操作规范、仔细,避免和排除各【gè】种要素【sù】的影【yǐng】响,使之得到精【jīng】确可靠的查【chá】验【yàn】成果【guǒ】。
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