1．取出ELISA试剂盒室温平衡30min，取出血样放至室温。

2．配标准品【pǐn】：取150uL标【biāo】准【zhǔn】品参与150uL标准【zhǔn】品稀释液稀释【shì】，顺次稀释5次。

3．加样：分别于各反应孔【kǒng】中【zhōng】参与【yǔ】标准品50uL，样品40UL，标【biāo】准品做复孔，样品做【zuò】3孔。

4．分别于样品孔中参与10UL抗体。

5．标准【zhǔn】品和样【yàng】品孔中分别参与50uL链酶【méi】亲和素-HRP，盖【gài】上封板膜,悄【qiāo】然轰动混匀，37℃温育【yù】60min。
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6．配洗刷液：将30倍浓缩洗刷液用蒸馏水30倍稀释后备用。

7．洗刷：留神【shén】揭开封板膜，弃去【qù】液【yè】体，甩干，每孔【kǒng】加200uL洗刷【shuā】液，静置30s后弃【qì】去，如【rú】此【cǐ】重复5次，拍干。

8．ELISA试剂盒显色：每孔先【xiān】参与显【xiǎn】色剂【jì】A 50uL，再加显色剂B 50uL，悄然轰动混匀，37℃避光显色6min。

9． 中止：每【měi】孔参与中止液50uL，中止反【fǎn】应（此【cǐ】时蓝【lán】色当即【jí】转为）。

10．测定：以空【kōng】白孔调零【líng】，450nm波长依序测量各【gè】孔的吸光度。测定【dìng】应在加中止液10min之【zhī】内【nèi】进行【háng】。

11．保存效果，收拾桌面。

12．分析处理数据