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上海酶联:有关原代细胞的培养方法
更新时间【jiān】:2024-9-23   点击次数:1094次

1、原代细胞组织块培养法 

(1)按照前述方【fāng】法选材,将【jiāng】组【zǔ】织剪成或【huò】切成1mm3巨细的【de】小块,并参与少量培【péi】养基使组织【zhī】湿润。 

(2)将小【xiǎo】块均【jun1】匀涂布于瓶壁,每【měi】小【xiǎo】块距离0.2 cm~0.5cm,一般【bān】在25mL培【péi】养瓶【píng】(底面【miàn】积为17.5cm2)可接种20~30小块为宜,小块【kuài】放置后,轻轻翻转培养【yǎng】瓶,使瓶底朝上【shàng】,然后于瓶【píng】内参与适【shì】量培养基盖好瓶【píng】塞,将瓶倾斜放置【zhì】在37℃温箱内。 

(3)培养2~4小【xiǎo】时,待小块贴附后,将培养【yǎng】瓶【píng】缓慢翻转【zhuǎn】平放,静置培养,动作要轻【qīng】,严禁摇摆和来回振荡【dàng】,以【yǐ】防因为激动而使小【xiǎo】块漂起而【ér】形【xíng】成培养失利,若组织块不易贴壁可预先【xiān】在瓶壁涂一薄层血清【qīng】、胎【tāi】汁或鼠【shǔ】尾胶【jiāo】原等【děng】。

2.消化培养法 

该方法是选用前述的消化松散法,原代细胞将阻止细胞生长【zhǎng】的【de】细胞间质(包【bāo】含基【jī】质、纤维等)去除,使【shǐ】细胞【bāo】松散形成【chéng】细【xì】胞悬液,然后分瓶培【péi】养。 

3.悬浮细胞培养法

关于悬【xuán】浮生长的细胞,如白血病细胞、骨髓细【xì】胞、胸水和腹水【shuǐ】中的癌细胞和**细胞无需【xū】消【xiāo】化,可选【xuǎn】用【yòng】低速离心别离【lí】,直接培【péi】养,或经细胞分层液别离后接种培【péi】养。 

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