1)要留心避【bì】免【miǎn】出【chū】现严峻溶血。血红蛋白中含有血红素基团,其【qí】有类【lèi】似【sì】过氧化物的活性,因而,在以HRP为符号酶的ELISA试剂盒测定【dìng】中,如【rú】血清【qīng】标本中血红蛋白浓度【dù】较高【gāo】,则其就很简单【dān】在温育进【jìn】程中吸附于固相,然后与后【hòu】边参加的HRP底物反应【yīng】显色。
2)样本【běn】的搜集及【jí】血清别离【lí】中要留【liú】心【xīn】尽量避免细菌污染,一则细【xì】菌【jun1】的成长,其所分泌【mì】的一些酶或许会对抗原抗【kàng】体等【děng】蛋白发作【zuò】分解作用【yòng】;二则一些细菌【jun1】的内源【yuán】性酶如大肠杆【gǎn】菌的β-半乳糖苷酶【méi】本身会对用相应酶作符号【hào】的测定办法发作非特异性烦【fán】扰。
3)血清标本【běn】如是以【yǐ】无菌操【cāo】作别离,则可以在【zài】2~8℃下保存一【yī】周,ELISA试剂盒如为有菌操作【zuò】,则【zé】建议冰冻保【bǎo】存。样本的长时间保存,应【yīng】在-70℃以下。
4)冰冻保存的血清标本须留心避免因停电等构成的重复冻融。ELISA试剂盒标本的重复冻融【róng】所发作的机【jī】械剪切力将对标【biāo】本中的【de】蛋白等分子发作【zuò】损坏【huài】作用,然后引【yǐn】起假【jiǎ】阴性【xìng】成果。此外,冻融标【biāo】本【běn】的混匀亦应【yīng】留心,不【bú】要进行【háng】剧烈振动,重复倒置混匀即可。
5)标本在【zài】保存中如出现细菌【jun1】污【wū】染所造【zào】成的的混【hún】浊或【huò】絮状物时,应离心沉积后取上【shàng】清检测。Elisa实验是一【yī】种敏【mǐn】感性高,特异性强,重复【fù】性好的实验确诊办法【fǎ】。由于其试【shì】剂安稳【wěn】、易保存,操作简【jiǎn】洁,成果判别较客【kè】观等要素【sù】,已广泛应用在免疫【yì】学查验【yàn】的各领域中【zhōng】。