当抗原【yuán】材料中的【de】干扰物质不易除掉，或不【bú】易得到足够【gòu】的纯化抗原【yuán】时，可用【yòng】此法检测特异性抗体。其原理为【wéi】标本【běn】中【zhōng】的抗【kàng】体【tǐ】和一定【dìng】量的酶标抗体竞赛与固相抗原结合。

标本中抗【kàng】体量越多，结合在固相上【shàng】的酶标抗【kàng】体愈少，因【yīn】此阳性【xìng】反响呈色【sè】浅于阴性【xìng】反响【xiǎng】。如抗原【yuán】为高纯度的【de】，可直接包被固【gù】相。如抗【kàng】原中会有【yǒu】干扰【rǎo】物质，直接包被不易成功【gōng】，可选用【yòng】捕获包被法，即先包被与固相抗原相【xiàng】应的抗体，然后参加抗原，构【gòu】成固相抗原。

洗【xǐ】刷【shuā】除掉抗【kàng】原中的杂质，然后【hòu】再加标本和【hé】酶【méi】标抗体进行竞赛结合反响。竞赛法测抗体【tǐ】有多种形【xíng】式【shì】，可【kě】将标本和酶标抗体与固相抗原【yuán】竞赛结合，抗HBc 。

ELISA一【yī】般选用此法。另一种【zhǒng】形【xíng】式为将标本与抗原【yuán】一起【qǐ】参【cān】加到固相抗【kàng】体中进行竞【jìng】赛结合，洗刷后再参加酶标抗体，与【yǔ】结合在固相【xiàng】上的抗原反响。抗HBe的检测一般选【xuǎn】用此法。 
 
小分子抗原或【huò】半抗原【yuán】因缺少【shǎo】可作【zuò】夹【jiá】心法的两个【gè】以【yǐ】上的位【wèi】点，因【yīn】此【cǐ】不能【néng】用双抗体夹心法进行测定，能够【gòu】选用竞赛法形式。其原【yuán】理是标本中的抗原和一定量的酶标抗原竞赛【sài】与固相【xiàng】抗体结合。标本中抗原量【liàng】含量【liàng】愈【yù】多，结合在固相上的酶标抗原愈少，终的显色也愈浅。小分子激素、药【yào】物等ELISA测【cè】定多用此【cǐ】法。