在细胞培育实验室中,血清是常见的试剂之一,常见的血清种属有【yǒu】人的和动物两【liǎng】种【zhǒng】,依【yī】据客【kè】户【hù】对产种类属与来【lái】源的【de】挑选【xuǎn】,价格也是不同的。
关于实验新手来说,稍有不慎就会【huì】影响到实验结果,甚【shèn】至【zhì】让花费几千元买来的【de】血清失【shī】掉作【zuò】用【yòng】。今天我司与您讨论“怎么【me】奇妙【miào】使用血【xuè】清培育【yù】细胞”。
咱们今天要说【shuō】的血管平滑肌细胞培育选用的是贴块【kuài】法,这种办法具有取得平滑肌【jī】细【xì】胞纯度高【gāo】,量多【duō】,操【cāo】作简洁的长处。但用贴块法易使平滑肌细胞胞质【zhì】内肌丝丧【sàng】失,亚【yà】细胞【bāo】器添【tiān】加【jiā】。
在这【zhè】办法中,大家可要注意【yì】啦!不同动【dòng】物血管结【jié】构有差异【yì】,猪【zhū】和猴【hóu】较易操作,但小【xiǎo】动物如兔、鼠因其血管小【xiǎo】,血管壁薄等特色,使之难以分【fèn】离。另【lìng】外安【ān】排块太薄,不【bú】易【yì】粘附培育基,也使细胞【bāo】较难成长。
我司特别提示,实验中请注意:
1. 依【yī】据培育细胞的种【zhǒng】属加入适量的【de】不同【tóng】血【xuè】清,一般可【kě】加入胎牛【niú】血清,若小牛血清增殖作用差,应加胎牛血清(FBS),通常【cháng】浓【nóng】度为【wéi】10%~20%。
2. 培育基的挑选:常用的有DMEM,M199培育基。培育【yù】兔的【de】平滑肌细胞用DMEM作用较【jiào】好。
3. 种植安排块的【de】数目,如【rú】75cm2的长颈瓶安排块不得少于30。