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ELISA试剂盒细节要求
更新【xīn】时间【jiān】:2024-9-23   点击【jī】次数:1067次

实验者们往往对结果zui为关注,而因此忽略了【le】细节问题【tí】,但结果取决于细【xì】节!做【zuò】实验,上【shàng】海酶联生物教【jiāo】您【nín】掌握ELISA试剂盒细节(供参考,了解更多可在本公司【sī】中留【liú】言)。
◆根据采用的载体分为:
1.疏水性聚脂布作为载体;
2.聚苯乙烯微量板为载体;
3.硝酸纤维膜为载体。
ELISA是【shì】将酶催化的放大【dà】作用与特【tè】异性抗原【yuán】抗体反应【yīng】结【jié】合起来的一种微量分析技术。酶标记【jì】抗【kàng】原或抗【kàng】体以后【hòu】,既不影响【xiǎng】抗原抗体反应的特【tè】异【yì】性,也不改变【biàn】酶本身【shēn】的【de】活性。因为【wéi】ELISA试剂盒价格低廉且准确性搞、反应【yīng】时间短等优【yōu】点,所以适合大【dà】批【pī】量的检测,一【yī】般常【cháng】常用于食品安全检测方面。
◆ELISA需要遵循的几个细节要点:
1、抗原或抗体能吸附于固相载体表面,并保持其免疫学活性;
2、抗原或【huò】抗【kàng】体可通过共价键【jiàn】与酶连接形成酶【méi】结合物,而此种酶结合物【wù】仍能保【bǎo】持【chí】其免疫学和酶【méi】学活性;
3、酶结合物与【yǔ】相应抗原或【huò】抗体结合后,可根据加入底物的颜色【sè】反应来【lái】判定是否【fǒu】有免疫【yì】反应的存在【zài】,而且颜色【sè】反应的深浅【qiǎn】是与标本中【zhōng】相应抗原或【huò】抗体的量成【chéng】正比例的,可根据【jù】已知浓【nóng】度的【de】抗原或抗体【tǐ】的颜色反应的深【shēn】浅绘制标准曲线并依此计算出未知样品【pǐn】中抗体【tǐ】或抗原的浓度【dù】。
◆注意事项:
1、标本宜在新鲜【xiān】时检测【cè】。如有细菌污染【rǎn】,菌体中【zhōng】可能含【hán】有内源性HRP,也会产生【shēng】假【jiǎ】阳性反应。保存过久【jiǔ】可发【fā】生【shēng】聚合在ELISA中可使本底加深。
2、冻结标本溶解后,蛋白质局部浓【nóng】缩,分布【bù】不均,应【yīng】充分混匀宜轻缓,避【bì】免【miǎn】气泡,可上下颠混合,不要在【zài】混匀【yún】器上【shàng】强烈震【zhèn】荡【dàng】。
3、浑浊或有沉淀的标本应先离心或过滤,澄清后再检测。
4、反复冻融会使蛋【dàn】白效【xiào】价【jià】降低,所以代测样本如需保存【cún】作多次检测,宜【yí】少量分装【zhuāng】冰【bīng】存。
除了以上内容,在ELISA试剂盒【hé】细节中,稀释前、后的样品必须充分【fèn】混匀,所【suǒ】有【yǒu】试剂【jì】在加样【yàng】前也须摇匀【yún】,以保证试验【yàn】的均【jun1】一【yī】性。

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