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瑞氏染液的配制方法
更新时【shí】间:2024-9-23   点击次数【shù】:1695次【cì】

(1) 瑞氏染液配制:

瑞氏染料 830gm或1g

甲醇(AR) 500ml或600ml

○先称干燥(事先【xiān】放入温箱【xiāng】干燥过夜)瑞氏染料放置乳钵内,用乳棒轻轻敲碎染料成【chéng】粉末,再行研【yán】磨至听不【bú】到研芝【zhī】麻声【shēng】即呈细粉末,加少【shǎo】许甘油【yóu】或甲【jiǎ】醇溶解研磨,使染料在乳缸内【nèi】显“一面【miàn】镜”光泽,而无【wú】染料粉粒沉着。
○再加较多量甲醇研【yán】磨呈一面镜光【guāng】亮,静置【zhì】片刻【kè】,将上层液体倒入一清洁储存【cún】瓶内(用甲醇空【kōng】瓶【píng】),再加甲醇研磨【mó】,重复数次【cì】,至【zhì】乳钵【bō】内染料及甲醇用完为止,摇匀,密【mì】封瓶口。
○存【cún】室温暗处,储存【cún】愈久,则染料溶【róng】解【jiě】、分解就越【yuè】好,一般储存3个月以上为【wéi】佳。


(2) 缓冲液:       

●缓冲液作用:
○染色对氢【qīng】离子浓度是十分【fèn】敏感的,据【jù】观察pH值的改【gǎi】变,可【kě】使蛋白质与染料形成【chéng】的化合物重新离解。
○缓冲液须保持【chí】一【yī】定的pH使染色稳定,PBS的【de】pH 一般在6.4~6.8,
○偏【piān】碱性染【rǎn】料【liào】可与缓【huǎn】冲液中【zhōng】酸基起【qǐ】中和作用,偏酸性【xìng】染料则与缓冲液中【zhōng】的碱基起【qǐ】中和作用,使pH恒定。


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