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常见的酶标板分为哪几类
更【gèng】新【xīn】时间:2024-9-23   点击次数:1201次【cì】

酶标板在酶联免疫吸附试验中, 参与【yǔ】免疫学反【fǎn】应的【de】抗原【yuán】、抗体、标【biāo】记抗体或抗原的纯【chún】度【dù】、浓度和比例;缓冲【chōng】液种类、浓【nóng】度和离子强【qiáng】度【dù】、pH值和【hé】反应温度、时间【jiān】等条件起着关键作用。

此【cǐ】外【wài】,作为载体【tǐ】的固相【xiàng】聚【jù】苯乙烯(Polystyrene)表面对抗原、抗体或抗原抗体复合物的吸【xī】附也起着重要作【zuò】用。

根据酶标板【bǎn】与蛋【dàn】白和其【qí】它分【fèn】子结合【hé】能力的不同【tóng】可以将酶标板分为以下几类:

1、高结合力酶标板:

酶标板经表【biǎo】面处理后蛋白结合能力大大增强【qiáng】,可【kě】达300~400ng IgG/cm2,主要结合的蛋白分子量>10kD。使用该类【lèi】酶标板可提高敏感【gǎn】性,并可相【xiàng】对减少包【bāo】被蛋白的浓度和用量,不足之处为较【jiào】易产【chǎn】生非特异性【xìng】反【fǎn】应【yīng】。抗原或抗体包【bāo】被后【hòu】,以【yǐ】非离子去污【wū】剂无【wú】法有效地封闭未结【jié】合蛋白的部位,需使用蛋白作为封【fēng】闭剂。

2、中结合力酶标板:

酶标板【bǎn】经表面疏水键【jiàn】被动与【yǔ】蛋白结合,适合作为分子【zǐ】量>20kD的大分子蛋白的固相载体,其【qí】蛋白结合能【néng】力为200~300ng IgG/cm2。

由于该类【lèi】酶标板【bǎn】所具有的仅与大分子结合【hé】的特性,适用【yòng】于作【zuò】为未纯化抗体或【huò】抗原的固相载【zǎi】体,可降低潜【qián】在的非特异【yì】性叉反应【yīng】。该类【lèi】板可以惰性蛋【dàn】白或非离子去污剂作为封【fēng】闭液【yè】。

3、氨基化酶标板:

酶标板【bǎn】经【jīng】表面改性处理后拥有带正电荷的氨基,其疏水键由【yóu】亲水键取代【dài】。该类酶标板适合作【zuò】为小分子蛋白的固【gù】相载体。使用合适的缓【huǎn】冲液和【hé】pH值【zhí】,其表【biǎo】面【miàn】可通过离子键与带【dài】负电荷【hé】的小分子【zǐ】结合。

由于其表面的亲水特性和可【kě】通过【guò】其它交【jiāo】联剂共价结合的能力,可用于固定【dìng】溶【róng】于Triton-100、Tween 20等【děng】去污剂的【de】蛋白分【fèn】子。该类板的缺陷为由于降低了疏水性,一【yī】部分蛋白【bái】分子无【wú】法结合【hé】;

此外,其表【biǎo】面【miàn】需有效地封闭。由【yóu】于亲水【shuǐ】和共价的【de】表面【miàn】特性,使用的封闭液必【bì】须能够与非【fēi】反应性氨基基团和所选择的交联剂中任何功【gōng】能基【jī】团发【fā】生作用【yòng】。

 

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