感受态【tài】细胞主要【yào】原理就是通过处理使细胞的通透【tòu】性变大，直观的说，使得细胞【bāo】膜表【biǎo】面出现一【yī】些孔洞，便于外【wài】源基因或【huò】载体进入感受态【tài】细胞。由于细【xì】胞膜的流动性【xìng】，这种孔洞会【huì】被细胞【bāo】自【zì】身所修复。

感受态细胞制作方法：

CaCl2法

1. 将快速生长【zhǎng】的大肠杆菌置于【yú】经低温（0℃）预处【chù】理的低渗氯化钙【gài】溶液中【zhōng】，便【biàn】会造成细胞膨胀【zhàng】，同【tóng】时Ca2+会使细【xì】胞膜磷脂【zhī】双分子层形成液晶结构，促使细胞外膜与内【nèi】膜间隙中的部【bù】分核酸酶解离开来【lái】，离开所在【zài】区域，诱导细胞成为感受【shòu】态细胞

细胞膜通【tōng】透性【xìng】发生变化，极易与外源DNA相粘附【fù】并【bìng】在【zài】细胞表面形成抗脱【tuō】氧核糖核酸酶的羟【qiǎng】基－磷酸【suān】钙复合物。

联合其它【tā】的二价金属离子【zǐ】（如Mn、Co）、DMSO或还原剂【jì】等物【wù】质处【chù】理【lǐ】细菌，则可使转【zhuǎn】化率提高100～1000倍。

2. 此时，将该体系转移到42℃下做短暂的热刺激【jī】（90s），细胞膜的液晶结构【gòu】会发生【shēng】剧烈扰【rǎo】动，并随机出现【xiàn】许【xǔ】多【duō】间【jiān】隙【xì】，外源DNA就可能被【bèi】细胞吸收。进入【rù】细胞的外源DNA分子通过复制【zhì】、表达【dá】，实现遗传信息的【de】转移，使受体细【xì】胞【bāo】出现新的遗【yí】传性状。

3. 将转化后的【de】细胞在选择【zé】性【xìng】培【péi】养基上培【péi】养，筛选出带有外源DNA分子的阳性【xìng】克【kè】隆。

电转法

电击法不需要预先诱导细菌的感受态【tài】，依靠短暂的【de】电击【jī】，促使DNA进入【rù】细菌，转化率zui高能达到【dào】109~1010转【zhuǎn】化【huà】子/ug闭【bì】环【huán】DNA。因【yīn】操作【zuò】简便，愈来愈为人们所【suǒ】接受